阿尔茨海默病（AD）是一种中枢神经系统退行性疾病，临床表现为进行性认知功能下降和行为损害，因其发病机制复杂，目前尚无有效的预防和治疗手段。近年来，依据AD发病机制和病理学特点进行靶向治疗逐渐成为新药开发的重点。靶向药物β淀粉样蛋白（Aβ）单克隆抗体阿度奴单抗和来卡内单抗获美国FDA批准用于AD的治疗，调节肠道菌群药物甘露特纳在中国批准上市，β分泌酶抑制剂、抗Aβ疫苗、tau蛋白聚集抑制剂等创新药物也表现出对AD的治疗潜力并先后进入临床试验。本文梳理近年来治疗AD的创新药物研究进展，分析创新药物研发策略，为治疗AD和开展相关新药研究提供参考和思路。

阿片类药物在疼痛治疗中发挥重要作用，但其在有效控制各类型急性和慢性疼痛的同时，也带来非医疗目的用药和药物成瘾的风险，造成阿片类药物危机。阿片受体在中枢神经系统广泛分布，介导复杂的生物学效应。阿片类镇痛药物的不良反应如呼吸抑制、依赖和成瘾等严重限制了其临床应用。目前，低成瘾性阿片类镇痛药物研发策略主要包括防滥用新制剂、靶向外周的阿片受体激动剂、阿片受体G蛋白信号通路偏向性激动剂、阿片受体异聚体激动剂和阿片受体多功能配体等，大部分正在进行非临床或临床研究，有一些新制剂药物已经上市。但这些措施在产生镇痛或其他治疗益处的同时，仍在一定程度上保留了传统阿片类镇痛药物的潜在滥用风险和其他不良反应，如何将镇痛作用与成瘾潜能完全分离面临重大挑战。因此，新型低成瘾性阿片类镇痛药物的研发仍需更多努力。

目的  探讨肿瘤血管破坏剂5，6-二甲基黄嘌呤-4-乙酸（DMXAA)对小鼠Lewis肺癌（LLC）转移的抑制作用及其机制。方法  制备2种小鼠肿瘤模型（LLC异位移植瘤小鼠模型和转移型LLC小鼠模型），评价DMXAA对LLC转移的抑制作用。LLC异位移植瘤小鼠模型制备成功后，随机分为3组：模型组（含1% DMSO的生理盐水，ip，2天1次）、模型+苏尼替尼组（30 mg·kg^-1，ip，2天1次）和模型+DMXAA组（25 mg·kg^-1，ip，给药1次）。首次给药后每隔1天测量小鼠移植瘤体积，并绘制移植瘤体积生长曲线和小鼠体重变化曲线；给药后2和5 d剥瘤称取瘤重，并将瘤组织进行免疫荧光染色，测定血小板内皮细胞黏附分子1（CD31）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）阳性表达，计算α-SMA/CD31荧光强度比值，表示移植瘤组织血管表面周细胞覆盖率；哌莫硝唑（pimonidazole）染色检测瘤组织低氧程度。转移型LLC小鼠模型制备成功后，随机分为3组：模型组（含1% DMSO的生理盐水，ip，1周2次）、模型+苏尼替尼组（60 mg·kg^-1，ip，1周2次）和模型+DMXAA组（25 mg·kg^-1，ip，给药1次）。首次给药后2和5周用小动物活体成像系统观察小鼠体内肿瘤转移，并进行荧光定量分析。结果  与模型组相比，模型+苏尼替尼组和模型+DMXAA组移植瘤体积和重量均显著减小（P<0.05，P<0.01）；模型+苏尼替尼组小鼠体重明显下降（P<0.05），而模型+DMXAA组则无显著差异。与模型组相比，苏尼替尼对LLC转移无影响，而给药后2周DMXAA明显抑制LLC转移（P<0.01）。给药后5 d，模型+苏尼替尼组和模型+DMXAA组移植瘤组织中周细胞覆盖率均显著升高（P<0.05）；模型+苏尼替尼组瘤组织低氧面积无明显变化，模型+DMXAA组瘤组织低氧面积显著降低（P<0.01）。结论  肿瘤血管破坏剂DMXAA显著抑制小鼠LLC生长和转移，其机制可能与其诱导肿瘤血管正常化和改善瘤组织低氧微环境有关。

阳离子脂质体在基因治疗和基因沉默领域被广泛应用，其数量繁多，结构多样，有优化和改善基因递送行为的功能，随着基因治疗研究的逐渐深入，新型阳离子脂质体也被不断开发。阳离子脂质体主要有4个组成部分，即亲水的阳离子头部、疏水的脂质尾部、连接键以及辅助脂质，每个部分的结构对基因递送中阳离子脂质的转染效率和细胞毒性具有重要影响。可电离阳离子脂质细胞毒性较低，已有产品上市。本综述可为阳离子脂质体的设计提供一个概念框架，为阳离子脂质体的选择提供一定理论支持。

成纤维细胞广泛分布于全身组织和器官中,参与细胞外基质的合成和重塑，介导组织损伤修复、炎症反应和免疫调节等生理病理过程。在组织纤维化、自身免疫病和肿瘤患者的病灶中均发现大量激活的成纤维细胞,其主要通过分泌胶原蛋白和纤维蛋白参与组织纤维化，影响肿瘤微环境，同时还分泌多种炎症因子和生长因子在自身免疫病和肿瘤中发挥免疫调节作用。近年研究表明，调控成纤维细胞激活能够有效延缓上述疾病的发生发展，以成纤维细胞激活标志物为靶标能够监测相关疾病的发展和治疗进程。因此，以成纤维细胞为靶点的治疗药物和诊疗手段有望在组织纤维化、自身免疫病和肿瘤等临床诊疗中实现新突破。

目的  研究小鼠骨髓移植后造血和免疫系统重建的动态过程，为优化造血干细胞移植治疗方案和药物研究提供支持。方法  60只CD45.2⁺雄性C57BL/6小鼠作为受体鼠，随机均分为正常对照组和移植组，移植组经致死剂量钴60射线全身照射后，经尾静脉输注移植CD45.1⁺雄性C57BL/6小鼠骨髓细胞，正常对照组尾静脉注射等体积PBS。移植后1，2，4，8和16周取2组受体鼠外周血、脾、淋巴结、胸腺和骨髓，外周血进行血常规检测，其他样本制备细胞悬液后利用自动细胞计数仪测定细胞总数，用荧光抗体染色，用流式细胞术分析髓系白细胞和红细胞祖细胞比例、巨核细胞及其祖细胞比例及造血干细胞比例。结果  骨髓移植后4周，移植组小鼠外周血白细胞和红细胞数量恢复至正常对照组同等或更高水平（P<0.05）；血小板数量虽有明显恢复，但直至16周仍低于正常对照组（P<0.05）。骨髓移植后4周，移植组小鼠外周血、脾、淋巴结和骨髓中髓系白细胞和B细胞及骨髓中巨核细胞和红细胞祖细胞的比例恢复至正常对照组同等水平，且髓系白细胞和B细胞均由自供体的CD45.1⁺ 细胞占据主导地位。骨髓移植后8周，移植组受体小鼠外周血、脾、淋巴结、胸腺和骨髓中T细胞的比例恢复至正常对照组相同水平，并以CD45.1⁺ T细胞占据主导地位。结论  骨髓移植后8周，受体小鼠的造血和免疫系统重建基本完成，但不同细胞的重建速度及同种细胞在不同部位的重建动态过程具有较大差异。

Hippo/YAP信号通路是一种进化上保守的蛋白质激酶级联反应，在多种生物过程如细胞增殖和分化、器官生长和组织再生中发挥重要作用。组织纤维化是一个持续且高度动态的过程，其特征是细胞外基质过度沉积造成不可逆的病理改变，最终导致多个组织器官衰竭。目前尚缺乏改善或逆转纤维化的靶向治疗策略。研究表明，异常激活的Hippo/YAP信号通路可通过调控胶原沉积、成纤维细胞过度增殖和上皮细胞分化等方式在纤维化发生发展过程中发挥作用，但具体作用机制尚未完全阐明。靶向Hippo/YAP信号通路主要涉及两方面机制：一是针对Hippo/YAP信号通路的上游分子进行靶向干预，主要通过抑制核心激酶活性或阻断与其他分子的相互作用而实现；二是针对Hippo/YAP信号通路下游YAP/TAZ的活性和YAP/TAZ-TEAD相互作用进行靶向干预。研究表明，当组织器官发生损伤时YAP/TAZ的磷酸化和亚细胞定位发生显著改变。本文对Hippo/YAP信号通路及其介导肺、心、肝、肾、胰腺和皮肤等纤维化的研究现状进行综述，以期为纤维化发病机制和靶向治疗药物研究提供新思路。

 RNA甲基化是常见的表观转录后修饰类型，其种类多样，包括1-甲基腺苷（m1A）、5-甲基胞苷（m5C）和N6-甲基腺苷（m6A）等，可作用于相应靶点，发挥特定生物学功能，且动态可逆。外源环境因素可诱导机体发生氧化应激、炎症、自噬和细胞周期失调等，并受到特定RNA甲基化修饰调控，出现表观遗传毒性效应，而这些改变作为新的关键分子事件，参与调控细胞衰老进程，影响衰老及年龄相关疾病的发生发展。RNA甲基化与细胞衰老的关联将为衰老的预防和干预提供新的理论依据和方向。

目的 基于调节单胺系统功能和神经免疫炎症研究新型5-羟色胺和去甲肾上腺素重摄取抑制剂（SNRI）ZBH2012001的抗抑郁作用机制。方法  ① 雄性ICR小鼠分为溶剂组（蒸馏水）、度洛西汀组（10或20 mg·kg^-1）、ZBH2012001组（5，10和20 mg·kg^-1），ig给药1 h后采用小鼠悬尾实验（TST）和强迫游泳实验（FST）2个行为绝望模型评价ZBH2012001的抗抑郁作用。② 采用放射性配体结合实验评价ZBH2012001与人源5-HT转运蛋白（hSERT）和NE转运蛋白（hNET）的靶标亲和力。③ 雄性ICR小鼠分为溶剂组（蒸馏水），度洛西汀组（10或20 mg·kg^-1）和ZBH2012001组（5，10和20 mg·kg^-1）；ig给药1 h后采用小鼠5-羟色氨酸（5-HTP）诱导甩头实验、育亨宾毒性增强实验初步评价ZBH2012001对5-羟色胺（5-HT）和去甲肾上腺素（NE）系统功能的影响。④ 雄性ICR小鼠分为溶剂组（蒸馏水+0.1%冰醋酸），利血平模型组（蒸馏水+利血平5 mg·kg^-1），度洛西汀（度洛西汀20 mg·kg^-1+利血平5 mg·kg^-1）组及ZBH2012001（ZBH2012001 5，10和20 mg·kg^-1+利血平5 mg·kg^-1）组，ig给予ZBH2012001 1 h后ip注射利血平：通过观察眼睑下垂、体温下降和运动不能行为评价ZBH2012001对利血平诱导的单胺系统功能下调的影响；采用TST评价ZBH2012001对利血平诱导的抑郁样行为的影响；采用高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ECD）检测利血平单胺耗竭模型小鼠海马组织中单胺递质及其代谢产物的含量；采用ELISA检测利血平诱导单胺耗竭模型小鼠海马组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）的含量；采用Western印迹法检测利血平诱导单胺耗竭模型小鼠海马组织中离子化钙结合适配分子1（Iba-1）和核因子κB（NF-κB）的表达。结果  ① 与溶剂组相比，BH2012001（5，10和20 mg·kg^-1）显著减少小鼠在TST中的不动时间（P<0.01），ZBH2012001 （20 mg·kg^-1）显著减少FST中的不动时间（P<0.05）。② ZBH2012001可竞争抑制［³H］-丙咪嗪与hSERT和［³H］-尼索西汀与hNET的结合，半抑制浓度（IC₅₀）值分别为84.95和712.90 nmol·L^-1。③ 与溶剂组相比，ZBH2012001（10和20 mg·kg^-1）可显著增加5-HTP诱导的小鼠甩头次数（P<0.01），提高育亨宾诱导的小鼠死亡率（P<0.05，P<0.01）。④ 在利血平诱导的小鼠抑郁模型上，与溶剂组相比，利血平模型组小鼠出现眼睑下垂，体温下降和运动不能（P<0.01），悬尾不动时间显著延长（P<0.01），海马NE，5-HT和DA水平显著下降（P<0.05，P<0.01），海马5-HT代谢转换率和DA代谢转换率显著升高（P<0.01），海马TNF-α和IL-6水平显著升高（P<0.05），海马Iba-1和NF-κB表达显著升高（P<0.05）；与模型组相比，ZBH2012001（5，10和20 mg·kg^-1）可显著拮抗利血平诱导的小鼠眼睑下垂和体温下降（P<0.01），ZBH2012001（10和20 mg·kg^-1）可显著缩短利血平小鼠的悬尾不动时间（P<0.05，P<0.01），ZBH2012001（20 mg·kg^-1）可显著增加利血平小鼠海马NE和5-HT的水平（P<0.05），降低5-HT代谢转换率（P<0.05），显著降低利血平小鼠海马TNF-α和IL-6的水平（P<0.05），ZBH2012001（5，10和20 mg·kg^-1）可显著降低利血平小鼠海马Iba-1表达（P<0.01），ZBH2012001（20 mg·kg^-1）可显著降低利血平小鼠海马NF-κB表达（P<0.05）。结论  ZBH2012001通过增强单胺系统功能以及抑制神经免疫炎症发挥抗抑郁作用。

随着基因治疗产品逐渐进入市场，迫切需要建立病毒载体介导的遗传毒性评价方法。目前应用广泛的病毒载体主要有2种：慢病毒载体和腺相关病毒载体。慢病毒载体能够稳定整合到宿主基因组中；而腺相关病毒载体基因组在宿主细胞核中主要以附加体形式存在，仍能以低频率随机整合到宿主细胞基因组中，其整合方式包括随机整合和靶向整合。本文对已有的病毒载体介导的遗传毒性评价方法，包括脱靶修饰的全基因组分析、整合位点分析、核型分析和评估细胞转化潜力试验等进行综述，并对建立准确快速的病毒载体介导的遗传毒性的评价体系予以展望，以期为进一步完善和研发新的病毒载体遗传毒性评价方法提供参考。

目的  基于人肾类器官建立顺铂诱导急性肾损伤（AKI）模型。方法  ①基于人多能干细胞（hiPSC）诱导技术设计并构建含有多种细胞类型的肾类器官，利用HE染色法和免疫荧光技术鉴定组织结构和细胞类型。② 基于构建的人肾类器官模型，将顺铂20，50和75 μmol·L^-1分别作用于人肾类器官模型48 h，观察肾类器官形态变化，Live/Dead染色法检测细胞存活率，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测肾损伤因子1（Kim-1）和炎症细胞因子白细胞介素8（IL-8） mRNA表达水平。结果  ① 组织学和免疫荧光实验结果表明，hiPSC诱导分化后可产生成熟的人肾类器官，该类器官具有原始肾小管样结构，并包含近端肾小管、远端肾小管、足细胞、肾间质内皮细胞和肾小管上皮细胞在内的多种细胞类型。② 单次给顺铂20，50和75 μmol·L^-1均造成细胞形态结构的破坏，管状结构大量消失；Live/Dead染色结果表明，顺铂可引起肾类器官细胞凋亡，20 μmol·L^-1组细胞存活率<50%，75 μmol·L^-1组存活率接近0。与正常对照组比较，Kim-1和IL-8 mRNA水平在不同浓度顺铂致AKI模型中均显著升高（P<0.01）。结论  成功构建人肾类器官模型，验证了使用人肾类器官体外模拟化疗药物致AKI的可行性，Kim-1联合IL-8有望为临床预测药物引发AKI的可能性和不良反应的应对措施提供科学依据和判断标准。

帕金森病、阿尔茨海默病和精神分裂症等神经精神疾病在发展过程中会出现幻觉、妄想等精神病症状，这些症状发病率高、治愈难，严重影响患者生活质量。尽管经典抗精神病药物氯丙嗪、舒必利和奋乃静等通过拮抗多巴胺2型（D₂）受体可治疗相关症状，但也会引发不可控的锥体外系反应和高泌乳素症等不良反应。近年来研究发现，奥氮平、氯氮平、利培酮和匹莫范色林等非经典抗精神病药物通过拮抗5-羟色胺2A（5-HT_2A）受体或同时拮抗5-HT2A受体（强）和D₂受体（弱）治疗神经精神疾病的幻觉症状。非临床研究结果表明，在多种因素诱导的幻觉模型上，非经典抗精神病药物均表现出良好的治疗作用；临床研究进一步证实，该类药物显著改善精神病症状（以幻觉和妄想为主），尤其是匹莫范色林，其对氯氮平、利培酮不敏感或耐受的患者仍能表现出良好的治疗效果。同时，非经典抗精神病药物不良反应的发生率和严重程度较低，总体耐受性较好。本文综述了5-HT_2A受体拮抗剂改善神经精神疾病伴随的幻觉症状的研究进展，为设计开发新型神经精神疾病治疗药物提供参考。

灵芝被广泛应用于食品（保健）、药品和化妆品等领域。灵芝酸A是一种具有重要药理活性的灵芝三萜类化合物。现代药理研究表明，灵芝酸A具有抗肿瘤、抗神经精神系统疾病、肝保护作用、降血脂作用、抗炎和肾保护作用等多种药理作用。本文对灵芝酸A的药理学作用及其机制研究新进展进行梳理与总结，为其进一步开发和应用提供参考。

目的  研究5-羟色胺2A受体（5-HT_2AR）激动剂2，5-二甲氧基-4-碘苯丙胺（DOI）对自由活动小鼠次级视觉皮质V2区场电位的影响。方法  将C57BL/6J小鼠手术埋置皮质脑电（ECOG）电极，恢复7 d后ip给予1%DMSO（溶剂），记录次级视觉皮质V2区局部场电位（LFP）30 min；而后ip给予DOI 2.0 mg·kg^-1，记录该区LFP 30 min；最后ip给予5-HT_2AR拮抗剂氟利色林0.3 mg·kg^-1，记录该区LFP 30 min。将数据导入Neuro Explorer软件进行频谱分析，用GraphPad Prism 8.0.2软件分析给药前后γ振荡和θ振荡功率谱密度变化，用Matlab软件分析θ振荡和γ振荡相位振幅耦合。结果  与给予溶剂相比，给予DOI 2.0 mg·kg^-1可显著增高次级视觉皮质V2区γ振荡（30~80 Hz）功率（P<0.05）和θ振荡（4~7 Hz）功率（P<0.05），显著降低θ振荡和γ振荡相位振幅耦合调制指数（P<0.01）；氟利色林可逆转DOI引起的次级视觉皮质V2区γ振荡和θ振荡功率的增高（P<0.05）。结论  DOI的致幻作用可能与其增高小鼠次级视觉皮质V2区γ振荡和θ振荡功率及降低θ振荡和γ振荡相位振幅耦合有关。

在人体药物代谢研究和肝病造模及药物筛选研究中，主要依赖于细胞培养做体外验证，实验动物模型做体内分析。然而离体环境下细胞状态不稳定；实验动物与人类之间存在种属差异，使得2种模型在预测体内药物代谢情况以及模拟人体肝病特征方面存在一定局限性。而人源化肝嵌合小鼠模型通过移植人肝细胞入活体小鼠的肝脏中并扩增，使其能发挥与人类肝脏相似的特异性功能。这一功能满足了多种研究需求，包括小鼠体内肝炎病毒的复制、肝脏代谢疾病的模拟、肝细胞靶点治疗药物的筛选，以及药物肝毒性评价等。因此，人源化肝嵌合小鼠是候选药物临床前药效验证和安全性评估的理想模型之一。本文针对三类代表性人源化肝嵌合小鼠模型，对其分类、构建原理、受限因素以及应用现状进行总结与展望，以期为人源化肝嵌合小鼠模型的选用提供一定参考。

近年来，为应对新型冠状病毒感染（COVID-19）的暴发，药物再利用成为寻找COVID-19治疗药物的有效策略。人工智能（AI）能够快速计算筛选大量药物数据库以获取候选药物，在药物再利用领域得到广泛应用。根据算法设计原理，AI应用于药物再利用治疗COVID-19研究的方法可分为3类：① 基于网络的模型，强调药物与疾病间关联性的识别，以揭示药物的潜在治疗机制；② 基于结构的方法，通过药物和靶点间结构相互作用的分析实现精确筛选；③ 机器学习/深度学习方法，利用复杂非线性数据的多维度处理进行候选药物预测。尽管AI在药物再利用中发挥了重要作用，但数据的质量和数量对AI计算结果影响显著；实验研究无法全面模拟人体的复杂生理环境，从而可能限制候选药物在非临床研究阶段的精确验证；而且针对原始适应证的药物优化可能影响候选药物在治疗COVID-19中的有效性，治疗时机和个体差异也可能对临床效果产生影响。本文对AI在药物再利用治疗COVID-19研究中的应用和挑战进行综述，以期为将AI技术进一步应用于治疗COVID-19药物研究提供参考。

钙激活氯离子通道（CaCC）是一类能通过胞内钙离子激活转运氯离子的通道蛋白，其主要在神经元和肌细胞中参与调节膜电位、细胞内钙平衡和细胞兴奋性等重要的生理作用。Anoctamin（Ano）家族中Ano1是最经典的CaCC，Ano1的靶向调节剂对癌症、囊性纤维化、高血压、腹泻和哮喘等疾病具有潜在治疗作用。自2008年Ano1首次被发现后，先后出现了多种CaCC特异性调节剂的筛选方法，主要包括基于荧光蛋白的高通量初级筛选、电生理膜片钳技术和虚拟筛选，进而发现了多种药理学作用不同的小分子调节剂。本文综述了目前较为主流的筛选方法的原理和优缺点，并对迄今发现的Ano1特异性调节剂的化学结构和潜在的应用进展进行综述。

目的  探讨加味天王补心丹（JWBXD）对模拟高原暴露大鼠失眠的改善作用及其机制。方法  ① 将30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、模型+JWBXD（9.6 mg·kg^-1）组、模型+天王补心丹（TWBXD，9.6 mg·kg^-1）组和模型+地西泮（DZP，3 mg·kg^-1）组。大鼠进行植入子手术，除正常对照组外，其余大鼠置入模拟5000 m海拔高原的低压低氧动物实验舱内，连续7 d。每天9∶00 ig给予相应药物，采用无线生理信号遥测系统进行信号采集和睡眠分析，观察药物对模拟高原暴露模型大鼠睡眠时间和睡眠结构的影响。② 将40只SD大鼠随机分为5组，分组、造模和给药同①，实验过程中每天观察大鼠一般状态并监测体重，造模第7天测试前肢抓力。采用ELISA检测血清促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT）和褪黑素（MLT）水平。Western印迹法检测大鼠下丘脑组织中昼夜节律基因节律周期调节蛋白2（Per2）、时钟节律调节蛋白（Clock）、隐花色素节律调节蛋白2（Cry2）、脑-肌肉Arnt样蛋白（Bmal1）、孤核受体REV-ERBα（NR1D1）和糖原合成酶激酶3（GSK-3β）以及松果体组织中褪黑素合成酶乙酰5-羟色胺O-甲基转移酶（ASMT）蛋白表达水平。结果  ① 与正常对照组比较，模型组大鼠睡眠总时间减少（P<0.01），觉醒时间增加（P<0.01），慢波睡眠显著减少（P<0.05），片段平均持续时间缩短（P<0.01）。与模型组比较，DZP，TWBXD和JWBXD均能延长低氧环境中大鼠睡眠时间（P<0.01），有效抑制觉醒（P<0.01）；DZP和JWBXD能够延长慢波睡眠时间（P<0.05，P<0.01），TWBXD无明显作用；JWBXD能够延长模型大鼠慢波睡眠片段平均持续时间（P<0.01），而DZP和TWBXD无此作用。② 与正常对照组比较，模型组大鼠前肢抓力显著下降（P<0.01）；血清ACTH，CRH和CORT水平升高（P<0.05，P<0.01），MLT水平降低（P<0.05）；下丘脑Per2，Cry2，GSK-3β和NR1D1表达水平均降低（P<0.05，P<0.01），Bmal1和Clock表达水平升高（P<0.05，P<0.01）；松果体内ASMT表达水平降低（P<0.05）。与模型组相比较，模型+JWBXD和模型+TWBXD组大鼠前肢抓力增加（P<0.01），模型+DZP组前肢抓力无显著变化；模型+JWBXD组血清CORT和ACTH含量减少（P<0.05），模型+JWBXD、模型+TWBXD和模型+DZP组血清CRH含量降低（P<0.01）而MLT水平升高（P<0.01）；模型+JWBXD组大鼠下丘脑Per2，Cry2，GSK-3β和NR1D1表达水平均升高（P<0.05，P<0.01）而Bmal1和Clock表达水平降低（P<0.05，P<0.01），模型+TWBXD组下丘脑Bmal1表达水平降低（P<0.01）而NR1D1表达水平增加（P<0.05），模型+DZP组下丘脑Per2，Cry2和NR1D1表达均显著增加（P<0.01）；模型+JWBXD组、模型+TWBXD组和模型+DZP组大鼠松果体内ASMT表达水平增加（P<0.05）。结论  JWBXD可改善模拟高原暴露模型大鼠睡眠结构，增加大鼠慢波睡眠持续时间，其机制可能与调节下丘脑核心时钟蛋白表达、促进MLT分泌及抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴功能亢进相关。

目的  探讨环磷酰胺（CTX）及其活性代谢衍生物4-氢过氧环磷酰胺（4-HC）对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的损伤效应及其机制。方法  用CTX〔0（细胞对照），0.01，0.1，1,5，10，20，40和80 mmol·L^-1〕和4-HC〔0（细胞对照），0.01，0.1，1,5，10，20，40和80 μmol·L-1）〕处理SH-SY5Y细胞48 h，应用IncuCyte ZOOM系统记录细胞形态变化和生长曲线；CCK-8法检测细胞活力；乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测细胞LDH释放率。CTX（0，1，5，10和20 mmol·L-1）和4-HC（0，1，5，10和20 μmol·L-1）处理SH-SY5Y细胞48 h，用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EdU）染色法检测细胞增殖；免疫荧光法检测DNA双链断裂标志物γ-H2AX的含量和线粒体膜电位变化。CTX（0，1，5和10 mmol·L-1）和4-HC（0，1，5和10 μmol·L-1）处理SH-SY5Y细胞48 h，SeaHorse XF检测细胞糖酵解及线粒体氧化磷酸化水平。结果  与细胞对照组相比，CTX组和4-HC组的细胞融合率曲线逐渐下降；细胞活力显著下降（P<0.01），半数抑制浓度（IC₅₀）分别为4.44 mmol·L-1和4.78 μmol·L-1；LDH释放率显著增加（P<0.01）；EdU+细胞百分比显著降低（P<0.01）；γ-H2AX+细胞百分比显著升高（P<0.05）；线粒体膜电位显著降低（P<0.05）；CTX和4-HC处理导致最大糖酵解能力、酵解储备、最大呼吸速率和ATP产生速率显著降低（P<0.05）。结论  CTX和4-HC对SH-SY5Y细胞具有细胞毒性作用，可降低细胞活力，破坏细胞膜结构，抑制细胞增殖，其机制可能与导致细胞DNA损伤、能量代谢紊乱和线粒体功能障碍密切相关。

目的  研究2型糖尿病大鼠ig给予司美格鲁肽（Sem）胶囊的药效学与药动学。方法  将雄性SD大鼠分为正常对照组、2型糖尿病模型组及模型+Sem胶囊0.839，1.678和2.517 mg·kg^-1组。采用高糖高脂饮食喂养结合ip给予链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病大鼠模型。给予STZ 7 d后，模型+Sem胶囊组空腹ig给予Sem胶囊，每天1次，连续给药14 d。定期检测各组大鼠体重、空腹血糖（FBG）和糖化血红蛋白（HbA1c）水平。连续给药结束后不同时间点采集模型+Sem胶囊0.839，1.678和2.517 mg·kg^-1组大鼠血浆，采用液相色谱-串联质谱法测定血浆中Sem的含量，绘制浓度-时间曲线，用WinNonlin非房室模型拟合主要药动学参数。结果 与模型组相比，模型+Sem胶囊各剂量组大鼠体重在Sem胶囊干预7和14 d后均明显下降（P<0.05，P<0.01）；FBG和HbA1c水平在Sem胶囊干预14 d后明显降低（P<0.01）。与正常对照组相比，模型+Sem胶囊1.678和2.517 mg·kg^-1组大鼠FBG和HbA1c水平在Sem胶囊干预14 d后无显著差异，提示其FBG和HbA1c水平基本恢复到正常水平。药动学结果表明，大鼠ig 给予Sem胶囊0.839，1.678和2.517 mg·kg^-1 14 d后Sem在血浆中的消除半衰期（t_1/2）分别为7.40±1.34，7.48±0.33和（8.23±0.90） h；达峰浓度（C_max）分别为18±9，81±23和（256±53） μg·L^-1；达峰时间（T_max）分别为0.06±0.13，1.56±0.88和（1.50±1.00） h；曲线下面积（AUC_0-t）分别为158±76，858±310和（3795±1539） μg·h·L-1； 蓄积指数（RAC）分别为1.12±0.05，1.12±0.01和1.15±0.04。结论  Sem胶囊ig给药可有效降低2型糖尿病模型大鼠体重、FBG和HbA1c水平，具有降糖减重的作用。连续给药14 d后，Sem胶囊在0.839~2.517 mg·kg^-1剂量范围内Sem在大鼠体内无蓄积， 暴露量随剂量增加而增大。

美国国家研究咨询委员会提出的“21世纪毒性测试——愿景与策略”对毒性评价和风险评估提出了新的要求和愿景，推动了新一代毒性测试方法和新一代风险评估方法学的发展。有害结局路径（AOP）作为一种先进的方法，具有较大应用潜力，近年来逐渐成为毒理学家关注的重点和新兴研究热点。定量AOP（qAOP）是在AOP理论上发展的新策略，其将定性AOP作为初始概念模型，通过数理模型描述剂量-响应和（或）响应-响应关系，提供了一种可定量预测体内毒性和风险的策略。本文就qAOP的概念和进展进行综述，介绍了2种构建qAOP的常用方法，贝叶斯网络模型和回归模型，并以实际案例展示qAOP在毒理学中的不同应用方向。

糖酵解与病毒感染性疾病关系密切，且病毒和宿主糖酵解之间的相互作用是多种病毒中存在的共性机制。因此，糖酵解调控可能是重要的抗病毒策略。新型冠状病毒（SARS-CoV-2）感染的流行给人类带来了巨大的灾难，需要从更多不同角度去探寻有效的解决方案。SARS-CoV-2可诱导宿主糖酵解水平升高，而宿主糖酵解水平在 SARS-CoV-2复制和感染中起重要作用，且与病程进展和多种临床症状及并发症相关。对宿主糖酵解与SARS-CoV-2感染相互作用的研究有助于阐明SARS-CoV-2致病机制并促进相关药物研发。本文对SARS-CoV-2感染与宿主糖酵解之间的相互作用进行综述，以期为从代谢调控角度阐明病毒感染与疾病的关系及研究应对措施提供新视角。

目的  探讨青蒿琥酯（Art）对氟化钠（NaF）所致骨细胞MLO-Y4损伤的改善作用及其分子机制。方法  NaF（2 mmol·L-1）与MLO-Y4细胞共孵育 48 h，构建MLO-Y4细胞损伤模型。细胞分为细胞对照组、NaF 组及NaF+Art 0.25，0.50和1.00 μmol·L-1组（Art预孵育2 h后，加NaF继续孵育12或48 h）。MTT法检测细胞存活率。钙黄绿素乙酰甲酯（calcein-AM）染色观察细胞活性。 化学比色法检测乳酸脱氢酶（LDH）水平，DCFH-DA染色检测活性氧（ROS）水平，化学比色法检测丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性，Hoechst33342染色和Annexin-V/PI染色分析细胞凋亡，JC-1染色检测线粒体膜电位（MMP），Lyso-Tracker和Mito-Tracker染色观察自噬泡形成和线粒体形态，荧光素酶法检测腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）含量，免疫荧光染色检测微管相关蛋白轻链3（LC-3）在线粒体中的表达，Western印迹法检测LC-3、p62、PTEN诱导假定激酶1（PINK1）和E3泛素-连接酶（Parkin）蛋白表达水平。结果  与细胞对照组比较，NaF组细胞存活率和细胞活性显著降低（P<0.01），LDH含量、ROS水平、MDA含量、细胞凋亡率和自噬泡形成明显增加（P<0.01），PINK1和Parkin蛋白表达增加（P<0.01），LC3在线粒体中的表达增加且LC-3Ⅰ向LC-3Ⅱ转换增加（P<0.01），SOD活性、MMP水平、ATP水平和P62蛋白表达显著降低（P<0.05，P<0.01）。与NaF 组比较，NaF+Art 0.25，0.50和1.00 μmol·L-1组细胞活性和存活率显著增加（P<0.01），LDH含量、ROS水平、MDA含量、细胞凋亡率和自噬泡形成明显减少（P<0.05，P<0.01），PINK1和Parkin蛋白表达下降（P<0.01），LC3在线粒体中的表达下降且LC-3Ⅰ向LC-3Ⅱ转换减少（P<0.01），SOD活性、MMP、ATP水平和P62蛋白表达显著增加（P<0.05，P<0.01）。结论  Art对NaF所致MLO-Y4细胞氧化损伤具有改善作用，其机制可能与减少细胞凋亡和线粒体自噬水平有关。

肾类器官是利用人多能干细胞或组织来源的成体干细胞诱导分化形成主要包含肾小管结构的类器官，由于缺乏血管网络的支持，其组织结构不成熟和生长受限，如何实现肾类器官的血管化是该领域亟待解决的难题。目前，免疫缺陷动物移植、改变诱导分化方案、微流控芯片及调整细胞外基质和氧气浓度等方法可促进肾类器官血管化，为肾类器官科学研究及其临床应用提供了新的研究视角。

目的  探讨辛伐他汀对小鼠高血脂合并脑缺血再灌注损伤（CIRI）的预防作用及机制。方法  将60只C57BL/6J小鼠分为假手术组、CIRI组〔采用大脑中动脉阻塞再灌注法（MCAO/R）制备小鼠CIRI模型〕、高脂组（ip给予泊洛沙姆407）、高脂+CIRI组（ip给予泊洛沙姆407，24 h后MCAO/R造模）、高脂+CIRI+辛伐他汀5和10 mg·kg^-1组（先ig给予辛伐他汀连续7 d，后按照高脂+ CIRI组处理）。再灌注24 h后，对各组小鼠进行神经功能缺损评分；转棒实验测定掉落潜伏期；自主活动测试小鼠活动次数；TTC染色测定脑梗死体积；激光散斑血流成像检测小鼠脑血流量；取全血分离血清，并测定总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）含量；实时荧光定量PCR和Westen 印迹法检测小鼠右脑皮质时钟基因Rev-erbα和Bmal1 mRNA及蛋白表达水平。 结果  与假手术组相比，CIRI组小鼠神经功能缺损评分升高（P<0.01），掉落潜伏期缩短（P<0.01），活动次数减少（P<0.01）。与CIRI组相比，高脂+CIRI组小鼠神经功能损伤加重（P<0.01）；脑梗死体积显著增加（P<0.01）；脑血流量显著降低（P<0.01）；血清中TC，TG，LDL-C及MDA含量显著升高（P<0.01），GSH-PX水平显著降低（P<0.01）；脑皮质Rev-erbα mRNA和蛋白表达水平显著下调（P<0.01）；Bmal1 mRNA和蛋白表达水平显著上调（P<0.01）。与高脂+CIRI组相比，高脂+CIRI+辛伐他汀5和10 mg·kg^-1组小鼠神经功能损伤减轻（P<0.01）；脑梗死体积显著减小（P<0.01）；脑血流量显著增加（P<0.01）；血清中TC，TG，LDL-C及MDA含量显著降低（P<0.01），GSH-PX水平显著升高（P<0.01）；脑皮质Rev-erbα mRNA和蛋白表达水平显著上调（P<0.01）；Bmal1 mRNA和蛋白表达水平显著下调（P<0.01）。结论  辛伐他汀预防性给药能有效减轻小鼠高脂血症合并CIRI，其机制与其降血脂及调节时钟基因表达有关。

产气荚膜梭菌（CP）是一种常见的人兽共患病菌，广泛存在于自然界中，其分泌的外毒素给人类健康和畜牧业造成较大影响和损失。CP最主要的致病毒素为α，β，ε和τ毒素及肠毒素和坏死性肠炎B样毒素，其导致的疾病各不相同。抗生素治疗是目前治疗CP感染的主要手段，但由于耐药性不断增长，控制CP感染愈发困难。近年来随着基因工程技术的快速发展，针对不同外毒素的疫苗或抗体有可能成为应对CP感染的新一代免疫治疗手段。研究表明，针对CP α毒素的疫苗可预防小鼠A型CP感染；抗α毒素的单链抗体、双价单链抗体和纳米抗体等，可与α毒素特异性结合，有效中和α毒素的磷脂酶C活性，在小鼠模型中对致死量α毒素攻击具有保护作用。本文简述CP的主要致病因子、致病机制和基因工程抗体治疗研究进展，为CP感染防治提供参考。

目的  探讨毛兰素对糖尿病肾病（DN）模型大鼠肾小球内皮细胞血管生成的影响及slit同源蛋白2（Slit2）/轴突导向受体蛋白1（Robo1）信号通路的作用。方法  采用高糖高脂饲料持续饲养雄性SD大鼠8周，ip给予链脲佐菌素35 mg·kg-1制备DN大鼠模型。将DN模型大鼠分为模型组及模型+毛兰素10，20和40 mg·kg-1组（ig给予毛兰素，持续8周），每组10只，同时设置正常对照组（ig给予0.5%羟甲基纤维素钠，持续8周）。尿蛋白定量试剂盒测定大鼠24 h尿蛋白水平，全自动生化分析仪检测血清空腹血糖（FPG）和血肌酐（Scr）水平，PAS染色观察大鼠肾组织病理变化，免疫荧光法检测肾组织血小板内皮细胞黏附分子31（CD31）和足细胞标志蛋白（PCX）表达水平，Western 印迹法检测肾组织Slit2和Robo1蛋白表达。结果  与正常对照组比较，模型组大鼠FPG、Scr和24 h尿蛋白水平以及肾组织CD31、Slit2和Robo1蛋白表达显著升高（P<0.01）；肾组织新增肾小球毛细血管，并出现肾小球肥大和系膜面积扩张，存在非管状CD31染色，缺少相邻PCX染色，以及部分CD31管状区域染色也缺乏相邻的PCX染色。与模型组比较，模型+毛兰素10，20和40 mg·kg-1组大鼠FPG、Scr和24 h尿蛋白水平及肾组织CD31、Slit2和Robo1蛋白表达显著降低（P<0.05，P<0.01）；肾组织新增肾小球毛细血管、肾小球肥大和系膜面积扩张现象减轻，CD31管状区域染色与PCX足细胞区域染色基本相邻。结论 毛兰素可能通过抑制Slit2/Robo1信号通路而抑制DN模型大鼠肾小球内皮细胞血管生成。

动物模型是研究抑郁障碍机制、筛选抗抑郁活性药物的有力工具，但目前尚无理想的模拟临床患者状态的模型。本文首先简述经典抑郁障碍动物模型的研究进展，而后综述与应激相关的动物模型，尤其是身体应激源和社交心理应激源诱导的模型，并介绍评估动物抑郁样行为的测试，讨论各模型优缺点和应用中的注意事项，最后针对抑郁障碍的高度异质性，阐述难治性抑郁障碍、躁郁症、围产期抑郁和经前心境恶劣障碍4种抑郁障碍亚型的动物模型研究进展。

随着工业和经济的快速发展，大量化学物质涌现，风险管理难度加大。传统的风险评估主要依赖于动物试验开展毒性测试，然而动物试验周期长，成本高，已无法满足风险评估的现实需求。毒性测试替代技术的日益成熟，标志着快速、灵敏、准确识别化学物质毒性成为可能。本文围绕毒性测试替代方法的研究与应用，综述毒性替代测试方法的背景、发展和国内外研究现状，及其在化妆品安全风险评估领域的应用进展，并对当前我国替代测试技术和风险评估发展过程中存在的问题进行了探讨，为我国化妆品健康风险评估体系建设提供参考。

可电离脂质构成的脂质纳米粒（LNP）是目前临床上最具应用前景的非病毒核酸药物递送载体之一，在递送基因治疗药物和疫苗等方面具有巨大潜力。LNP的主要成分可电离脂质对LNP的内涵体逃逸率、转染效率、器官靶向性和安全性等起决定性作用。可电离脂质的亲水头基含有叔胺基，可提高LNP缓冲能力，进而改变其pKa值，并含有咪唑，可增强mRNA-LNP的稳定性和转染活性；连接体含有酯基能够高效诱导基因沉默并可提高其降解速率和安全性；疏水尾数量在3～4个，具有1～2个不饱和度和8～18个碳链长度时，LNP能够高效诱导基因沉默，同时含有分支或不对称的疏水尾时可提高LNP的转染效率。本综述从可电离脂质的化学结构出发，总结了其结构对载核酸药物LNP的转染效率和安全性的影响，并总结归纳其构效关系，为新型可电离脂质的研究提供借鉴。

目的  探讨白细胞介素32（IL-32） 对人脐带来源间充质干细胞（HuMSC）成脂分化的调控作用。方法  ① 用肿瘤坏死因子α（TNF-α）20 μg·L^-1和干扰素γ（IFN-γ） 20 μg·L^-1处理HuMSC 24 h得到激活的HuMSC （S-HuMSC），流式细胞术检测HuMSC和S-HuMSC表面标志物CD14，CD34，CD45，CD73，CD90和CD105表达鉴定其表型；对HuMSC和S-HuMSC进行成脂诱导10 d后进行油红O染色检测脂滴面积，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测成脂相关转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、CCAAT增强子结合蛋白α（C/EBPα）和脂肪酶（ADI）mRNA表达，测定其成脂分化能力；成骨诱导14 d后进行碱性磷酸酶（ALP）染色检测ALP着色面积，RT-qPCR检测成骨相关转录因子Runt相关转录因子2（RUNX2）、ALP和无远侧同源盒5（DLX5）mRNA表达，测定其成骨分化能力。②构建含有过表达IL-32基因序列且带有绿色荧光蛋白及嘌呤霉素抗药基因的慢病毒载体和阴性对照（NC）空载体并收获慢病毒，分别感染HuMSC得到IL-32^highHuMSC和NC-HuMSC。对HuMSC，NC-HuMSC和IL-32^highHuMSC进行成脂诱导分化，于诱导后第0，3，5，7，10和14天进行油红O染色检测细胞内脂滴形成面积，RT-qPCR检测成脂分化相关转录因子PPARγ，C/EBPα和ADI mRNA表达。结果  ① 流式细胞术检测结果表明，HuMSC和
S-HuMSC均高表达CD73，CD90和CD105，低表达或不表达CD14，CD34和CD45，两者表型符合MSC的生物学特征。HuMSC和S-HuMSC成脂和成骨诱导分化后，与各自自分化对照组相比，诱导组ALP染色面积和脂滴面积增加（P<0.01），成骨分化相关转录因子RUNX2，ALP和DLX5及成脂分化相关转录因子PPARγ，C/EBPα和ADI mRNA表达亦显著增加（P<0.01），表明两者均具有MSC的特性。与HuMSC诱导组相比，S-HuMSC诱导后脂滴形成面积明显减少（P<0.01），成脂分化相关转录因子PPARγ，C/EBPα和ADI mRNA表达亦显著下降（P<0.05），且S-HuMSC高表达IL-32 （P<0.01）。② HuMSC，NC-HuMSC和
IL-32^highHuMSC体外成脂诱导后，从第3天开始IL-32^highHuMSC诱导组细胞脂滴形成面积明显小于HuMSC和NC-HuMSC诱导组（P<0.01），且成脂相关转录因子PPARγ，C/EBPα和ADI mRNA表达也显著降低（P<0.05）。结论  过表达IL-32可显著降低HuMSC的成脂分化能力。

目的  建立糖尿病（DM）合并新型冠状病毒（SARS-CoV-2）感染小鼠模型，研究DM合并SARS-CoV-2感染病程发展中的重要病理生理变化。方法  将野生型（WT）小鼠和由细胞角蛋白18基因启动子驱动的人血管紧张素转化酶2受体（K18-hACE2，简称hACE2）的转基因小鼠分别随机分为溶剂对照组、DM组、SARS-CoV-2病毒刺突蛋白感染（S）组以及DM合并S蛋白感染（DM+S）组，每组10~12只。除溶剂对照组及S组外，其余组通过10周高脂饮食后连续3 d  ip 给予链脲佐菌素（STZ）40 mg·kg-1诱导DM症状，溶剂对照组及S组给予等体积0.1 mol·L^-1柠檬酸钠缓冲液。在此基础上，S组及DM+S组小鼠经鼻腔滴入15 μg SARS-CoV-2 S蛋白与1 g·L^-1聚肌胞苷酸（Poly [I:C]）的混合溶液50 μL，溶剂对照组滴鼻给予等体积无菌水。在高脂喂养第6周和ip 给予STZ 1周后，以口服葡萄糖耐量实验评价小鼠糖耐量水平及胰岛β细胞功能。高脂喂养第6周至ip 给予STZ 2周后，每周用血糖仪检测小鼠随机血糖及空腹血糖。DM小鼠S蛋白感染前及感染24，48和120 h后，每组取3只小鼠颌下静脉取血后处死并取肺组织，采用苏木精-伊红染色法观察合并S蛋白感染前后的肺组织病理改变。S组小鼠在感染S蛋白前及感染6, 24, 48, 72和120 h后采血，Luminex液相芯片技术检测小鼠血浆细胞因子白细胞介素1β（IL-1β）、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17、干扰素诱导蛋白10（IP-10）、干扰素γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）和粒细胞集落刺激因子（G-CSF）水平，ELISA检测血浆硫酸乙酰肝素（HS）水平；将细胞因子水平、HS水平与小鼠感染S蛋白后的肺部病理损伤程度进行Spearman相关性分析。结果  STZ合并高脂饮食可诱导小鼠DM样表现，hACE2-DM组随机血糖（P<0.01）和1周后的空腹血糖（P<0.05）均显著高于WT-DM组，且hACE2-DM小鼠胰岛功能损伤程度显著高于WT-DM小鼠（P<0.05）。与DM组相比，DM+S组小鼠均表现出更严重的肺部病理变化，并伴有大量炎症浸润和肺间质增厚。与溶剂对照组相比，S蛋白感染6 h，WT-S组小鼠血浆中促炎细胞因子G-CSF，IL-6和IP-10均显著升高（P<0.01），S蛋白感染24 h，促炎细胞因子IL-17和抗炎细胞因子IL-10均显著升高（P<0.05）；S蛋白感染6 h，hACE2-S组血浆中促炎细胞因子IL-1β，IL-6，TNF-α，MCP-1，
G-CSF和IP-10均显著升高（P<0.05，P<0.01）；WT-DM+S组和hACE2-DM+S组IL-17分别在S蛋白感染24 和6 h显著升高（P<0.01，P<0.05），hACE2-DM+S组IFN-γ和IL-1β延迟至48 h显著升高（P<0.05，P<0.01），MCP-1延迟至72 h显著升高（P<0.05）。与溶剂对照组相比，S蛋白感染6和24 h后，WT-S组血浆中HS水平显著升高（P<0.05，P<0.01），48 h开始降低；同时，与WT-S组相比，感染6 h后，WT-DM+S组HS水平略升高，24 h出现降低；hACE2-S组HS水平于24 h显著升高（P<0.01），且在S蛋白感染24，48和120 h后与WT-S组基本持平；S蛋白感染6，24 和48 h后，hACE2-DM+S组血浆HS水平均显著升高（P<0.01，P<0.05），升高持续时间较其S组长。小鼠血浆中IL-1β，IL-10，MCP-1，IP-10，G-CSF以及HS水平与DM+S小鼠肺损伤程度呈正相关（P<0.05，P<0.01）。结论 本研究建立的DM合并SARS-CoV-2 S蛋白感染小鼠模型能成功模拟临床患者的部分病理生理特征，主要表现为较单纯感染免疫反应钝化，HS水平升高且持续时间较长。IL-1β，IL-10，MCP-1，IP-10，G-CSF以及HS可能有助于及时了解DM合并SARS-CoV-2感染患者的病程。

目的  探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）刺突糖蛋白（S蛋白）对人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的损伤效应及其机制。方法  用S蛋白0（细胞对照组），25，50，75和100 mg·L^-1处理SH-SY5Y 24 h，CCK-8法检测细胞活力；比色法检测乳酸脱氢酶（LDH）释放率；EdU试剂盒检测细胞增殖；荧光素酶发光法检测细胞内ATP含量；JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位（MMP）；Seahorse XF检测细胞糖酵解及线粒体氧化磷酸化水平。结果  与细胞对照组相比，S蛋白25，50，75和100 mg·L^-1组细胞活力显著降低（P<0.01），半数抑制浓度（IC₅₀）为65.05 mg·L^-1；LDH释放率显著增加（P<0.01）;EdU阳性细胞比例显著降低（P<0.01）；S蛋白75和100 mg·L^-1组细胞内ATP含量显著降低（P<0.01）；S蛋白50和75 mg·L^-1组细胞内MMP显著降低（P<0.05，P<0.01）；S蛋白50 mg·L^-1组基础糖酵解水平和糖酵解能力的最大值显著升高（P<0.05，P<0.01），S蛋白25和50 mg·L^-1组呼吸能力最大值显著升高（P<0.05，P<0.01）。SH-SY5Y细胞活力与细胞内ATP含量和MMP均呈正相关（r²=0.9209，P=0.001; r²=0.6170，P=0.0025）；与反映细胞糖酵解水平的细胞基础糖酵解水平和糖酵解能力最大值呈负相关（r²=0.5194，P=0.0285; r²=0.6664，P=0.0073），与反映线粒体氧化磷酸化水平的ATP生成能力呈负相关（r²=0.8204，P=0.0008）。结论  S蛋白使SH-SY5Y细胞活力下降，抑制细胞增殖，其机制可能与干扰神经细胞内能量代谢密切相关。

目的  探讨牙髓干细胞（DPSC）对肺微血管内皮细胞（PMVEC）低氧损伤的修复作用及机制。方法  ① 建立PMVEC低氧损伤模型，用氯化钴0（细胞对照），10，25，50和100 μmol·L^-1处理PMVEC 72 h，CCK-8法检测细胞存活率，Western印迹法检测低氧诱导因子1α（HIF-1α）、闭锁小带蛋白1（ZO-1）和闭合蛋白（OCLN）的蛋白表达水平。② 设细胞对照组、模型组和模型+DPSC组，免疫荧光法检测细胞活性氧（ROS）水平；Western印迹法检测ZO-1和OCLN蛋白水平。③设模型组、模型+DPSC组和模型+DPSC敲低超氧化物歧化酶1（SOD1）组，Western印迹法检测ZO-1和OCLN蛋白水平。结果  ① 与细胞对照组相比，氯化钴100 μmol·L^-1处理PMVEC后细胞存活率>80%，HIF-1α蛋白水平升高（P<0.05），ZO-1和OCLN蛋白水平降低（P<0.01），PMVEC低氧损伤模型构建成功。② 与细胞对照组相比，模型组ZO-1和OCLN蛋白水平降低（P<0.01），ROS水平升高（P<0.01）；与模型组相比，ZO-1和OCLN蛋白水平升高（P<0.05），模型+DPSC组ROS水平降低（P<0.01）；③与模型组相比，模型+DPSC组ZO-1和OCLN蛋白水平升高（P<0.01）；与模型+DPSC组相比，模型+DPSC敲低SOD1组ZO-1和OCLN蛋白水平降低（P<0.01）。结论  DPSC通过调节氧化应激修复PMVEC低氧损伤。

目的  总结国家药物安全评价监测中心2013-2022年SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验各指标的正常值范围，建立SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验各指标的背景数据库，为药物胚胎-胎仔发育毒性评价提供参考。方法  对本中心2013-2022年11项SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中对照组共计205只孕鼠和3037只胎鼠各项胚胎发育和胎仔生长发育指标进行统计分析，计算其平均数、标准差、变异系数和95%置信区间。指标包括孕鼠妊娠期体重和体重增长幅度、孕鼠摄食量、妊娠结局（妊娠率、平均黄体数、平均着床数、平均活胎数、活胎率、吸收胎率、死胎率）、胎仔生长发育情况（胎仔重、胎盘重、性别比）、胎仔外观异常率、内脏异常率和骨骼异常率。结果  孕鼠妊娠期体重呈增长趋势，妊娠后期体重增长幅度明显增大。孕鼠摄食量随着妊娠时间的增加呈增长趋势。妊娠第20天进行剖腹产，妊娠率为93.2%，平均黄体数、着床数和活胎数分别为18.0±3.2，15.9±2.8和14.8±3.0，活胎率为93.4%，死胎率为6.6%；胎仔雄/雌性别比为0.94，平均体重为（3.6±0.3）g，胎盘平均重量为（0.6±0.3）g。胎仔外观异常发生率约为0.2%，内脏异常率约为0.8%。骨骼异常率约为1.2%，未骨化和骨化不全的发生率较高，主要发生于胸骨和舌骨等，胎仔的掌骨骨化数、跖骨骨化数和骶尾椎骨化数分别为7.0±0.7，8.0±0.1和7.4±0.5，第Ⅰ~ Ⅳ胸骨骨化率较高，平均为98.6%~99.9%，第Ⅴ胸骨骨化率为（68.0±28.4）%，第Ⅵ胸骨骨化率为（82.8±23.9）%。结论  初步建立了本GLP实验室SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中各指标背景数据库，为生殖毒性研究提供参考。

整合测试与评估方法（IATA）是一种毒理学评估决策的新技术方法，它将化学物质现有的理化特性、动物测试和非动物测试等多种来源的信息源进行整合，通过一系列迭代策略的评估和分析，以获得风险评估结论，可为制定化学物质的风险管理决策提供依据。IATA已在皮肤致敏、眼刺激和遗传毒性等领域得到越来越广泛的应用。本综述简要介绍IATA相关的概念内涵，梳理框架要素和序贯流程，阐释常用的框架构建方法，分享多种暴露场景下的应用案例，并对IATA未来研究方向进行展望，以期为化学物质风险评估提供更好的方法学支撑。

随着高通量技术的发展和海量毒理学数据的涌现，毒理学研究步入大数据时代。如何高效整合现有的毒理学数据、阐明化学物质毒作用规律并利用规律提示新信息，实现新化学物质毒性高效预测，是毒理学研究的前沿问题之一。鉴于传统化学物质毒性测试方法高成本、低通量且难以揭示机制信息，迫切需求高通量预测模型。机器学习方法已应用于毒性测试，如监督学习模型、无监督学习模型、深度学习模型、强化学习模型和迁移学习模型，其常用的化学物质特征数据主要包括化学物质结构数据、文本数据、毒理基因组数据和图像数据。将机器学习应用于毒性测试的研究潜力巨大，且取得一定进展，但目前研究主要集中于数据处理和模型开发，尚未形成应用度广、共识性强的方法。此外，机器学习模型的预测精度不仅取决于算法，亦受到数据质量的影响，算法与数据质量的相互促进发展亦是一大挑战。总之，毒理学领域的数据处理和模型构建需要跨学科的合作和技术创新，随毒理学数据库的日趋完善，各种模型算法的不断优化，基于机器学习模型开展新化学物质毒性预测将日益高效、准确，对保障人类健康和环境安全起到重要作用。

目的  探讨真核翻译延伸因子1A1（eEF1A1）对水疱性口炎病毒（VSV）和单纯疱疹病毒（HSV-1）复制的影响，以确定一个广谱抗病毒新靶点。方法  在人皮肤成纤维细胞（BJ-5ta）中转染小干扰RNA （si-eEF1A1）抑制eEF1A1表达，同时设置阴性对照组，用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）与Western印迹法检测转染效率，制备eEF1A1基因沉默的细胞模型。用VSV感染细胞模型，检测细胞内VSV的基因拷贝数和蛋白水平；用HSV-1感染细胞模型，检测细胞内HSV-1的mRNA水平和蛋白水平。用聚胞苷酸〔poly（I：C）〕或脱氧核糖核酸钠盐（HT-DNA）分别转染细胞模型，RT-qPCR检测干扰素β（IFN-β）、趋化因子10（CXCL10）和干扰素刺激基因56（ISG56）的mRNA水平，Western印迹法检测干扰素调节因子3（IRF3）和TANK结合激酶1（TBK1）蛋白磷酸化水平。结果  与阴性对照组相比，eEF1A1基因沉默组eEF1A1的mRNA水平和蛋白水平显著降低（P<0.01），eEF1A1基因沉默的细胞模型构建成功。与阴性对照组相比，eEF1A1基因沉默组的VSV基因拷贝数下降70%~80%，VSV蛋白水平显著降低（P<0.01）；HSV-1的mRNA水平下降50%~60%，HSV蛋白水平显著降低（P<0.01）。poly（I：C）或HT-DNA刺激后，与阴性对照组相比，eEF1A1基因沉默组的IFN-β、ISG56和CXCL10的mRNA水平以及IRF3与TBK1的蛋白磷酸化水平无显著差异。结论  eEF1A1调控VSV和HSV-1病毒复制，提示eEF1A1对RNA病毒和DNA病毒具有潜在的广谱调控作用，且可能不通过胞内核酸识别激活的免疫通路。

目的  建立以成纤维细胞激活蛋白（FAP）基因启动子为响应元件的新双荧光素酶报告基因系统建的心肌纤维化防治药物筛选方法。方法  体外扩增小鼠FAP基因启动子片段，克隆至psiCHECK2质粒替换HSV-TK启动子，获得新的重组质粒psiCHECK2-FAP。重组质粒经限制性内切核酸酶Hind Ⅲ消化后，进行琼脂糖凝胶电泳鉴定并纯化片段测序验证；将psiCHECK2-FAP瞬时转染至小鼠心肌成纤维细胞（MCF）培养24 h后，分别给予转化生长因子β1（TGF-β1）5 μg·L-1，血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）1 μmol·L-1或棕榈酸（PA）100 μmol·L-1处理0，12，24和48 h，双荧光素酶报告基因实验检测荧光素酶活性。将psiCHECK2-FAP瞬时转染至MCF细胞培养24 h后，达格列净（Dapa）1 μmol·L-1预处理1 h，再分别添加TGF-β1（5 μg·L-1），Ang Ⅱ（1 μmol·L-1）或PA（100 μmol·L-1）处理24 h，双荧光素酶报告基因实验检测荧光素酶活性，Western印迹法检测MCF细胞中Ⅰ型胶原蛋白（Col Ⅰ）和Col Ⅲ的蛋白表达。结果  Hind Ⅲ将psiCHECK2-FAP切成2个片段且条带大小符合预期，测序结果与理论序列完全一致。与空白对照组相比，TGF-β1，Ang Ⅱ和PA组均可显著增加MCF细胞中Col Ⅰ和Col Ⅲ表达（P<0.05，P<0.01）；分别与TGF-β1，Ang Ⅱ或PA组相比，Dapa干预后则显著降低Col Ⅰ和Col Ⅲ表达（P<0.05，P<0.01）；与空白对照组相比，TGF-β1，Ang Ⅱ或PA均可显著增加荧光素酶活性（P<0.05，P<0.01），24 h达最大值；分别与TGF-β1，Ang Ⅱ或PA相比，Dapa干预后则显著降低荧光素酶活性（P<0.05，P<0.01）。结论  以FAP基因启动子为响应元件的新双荧光素酶报告基因系统在MCF细胞中对促心肌纤维化因子表现出较好的敏感性，为心肌纤维化防治药物的研发提供策略。

目的  探究硫化汞纳米颗粒（HgS-NP）暴露对秀丽隐杆线虫（简称线虫）不同神经递质类型神经元的影响。方法  采用野生型N2线虫以及绿色荧光蛋白特异性标记转运蛋白或生物合成酶的γ-氨基丁酸（GABA）能、谷氨酸（Glu）能、多巴胺（DA）能、乙酰胆碱（ACh）能和5-羟色胺（5-HT）能神经元的转基因线虫（EG1285，DA1240，BZ555，LX929和GR1366），通过固体暴露的方式，将同步化后的L4期线虫经不同浓度HgS-NP处理。① 5种转基因线虫暴露于HgS-NP 0（溶剂对照组），250，500和1000 mg·L^-1 72 h，采用荧光显微镜观察转基因线虫不同神经递质类型神经元绿色荧光的表达。② 野生型N2线虫暴露于HgS-NP 0（溶剂对照组）和1000 mg·L^-1 72 h，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测33种GABA能和Glu能神经递质系统相关基因mRNA表达水平。结果  ① 与同基因型溶剂对照组线虫相比，暴露于不同浓度HgS-NP后，EG1285线虫出现GABA能神经元胞体缩小、树突断裂和神经元缺失，神经元相对荧光强度显著降低（P<0.05）；暴露于HgS-NP 1000 mg·L^-1后，DA1240线虫头部Glu能神经元缺失，相对荧光强度显著降低（P<0.01）；然而，暴露于不同浓度HgS-NP后，BZ555、LX929和GR1366线虫的DA能、ACh能和5-HT能神经元形态及相对荧光强度均无明显改变。② 与溶剂对照组相比，野生型N2线虫暴露于HgS-NP 1000 mg·L^-1后，仅编码非N-甲基-D-天冬氨酸类Glu受体的glr-7和glr-8的mRNA表达水平升高（P<0.05），其余31种GABA能和Glu能神经递质系统相关基因mRNA表达水平均无明显改变。结论  较高剂量的HgS-NP暴露72 h可损伤线虫的GABA能和Glu能神经元，而对DA能、ACh能和5-HT能神经元无明显影响。