目的  探究孤啡肽受体（NOPR）激动剂Ro 64-6198对大鼠海洛因奖赏效应、奖赏动机和复吸行为的影响。方法  采用大鼠海洛因自身给药模型，进行海洛因奖赏效应、奖赏动机测试、线索诱导复吸、海洛因引燃诱导的复吸测试。成年雄性SD大鼠采用固定比率1强化程序训练海洛因0.05 mg·kg^-1自身给药，建立稳定海洛因自身给药模型后，将大鼠随机分为溶剂组（1% DMSO，sc）和Ro 64-6198（0.3、1和3 mg·kg^-1，sc）处理组，每组6只，分别sc给予相应药物，30 min后进行奖赏效应测试，恢复1 d训练后再次随机分组，在累进比率程序下进行奖赏动机测试，处理同奖赏效应测试。在完成奖赏效应和动机测试后，大鼠戒断14 d，并进行连续3 d消退训练。第31天进行条件性线索（CS）诱导的复吸测试，将大鼠随机分为溶剂组（1% DMSO，sc）、Ro 64-6198（0.3、1和3 mg·kg^-1，sc）处理组，每组6只，测试前30 min sc给予溶剂或相应药物。第32天，大鼠随机分为溶剂组（1% DMSO，sc），海洛因引燃组，Ro 64-6198（0.3、1和3 mg·kg^-1，sc）处理组，每组6只。除溶剂组外，各组在测试前10 min ip给予海洛因0.5 mg·kg^-1，进行海洛因引燃诱导（0.5 mg·kg^-1，ip）的复吸测试。在另一组CS诱导的复吸测试中，将大鼠随机分成溶剂组（1% DMSO，sc）和Ro 64-6198 1 mg·kg^-1单独处理组、SB-612111 1 mg·kg^-1单独处理组、Ro 64-6198和SB-612111联合处理组（各1 mg·kg^-1，sc），每组6只，分别sc给予溶剂或相应药物，30 min后进行CS诱导的复吸测试。复吸测试结束后，取腹侧被盖区（VTA）组织，将组织分为空白组、溶剂组（1% DMSO，sc）和Ro 64-6198 1 mg·kg^-1处理组，每组3只，应用Western印迹法检测环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）的磷酸化水平和脑源性神经营养因子（BDNF）的表达水平。应用免疫荧光实验检测VTA中NOPR及磷酸化CREB（p-CREB）的定位与表达水平，分组及处理同Western印迹法实验。结果  急性给予Ro 64-6198 3 mg·kg^-1可降低海洛因摄入量及动机断点值，Ro 64-6198 0.3、1和3 mg·kg^-1能显著降低完成最后一针的有效鼻触数。在复吸行为测试中，Ro 64-6198 1和3 mg·kg^-1显著抑制CS和海洛因引燃诱导的复吸行为，Ro 64-6198 1 mg·kg^-1的抑制效应在联合给予NOPR 1 mg·kg^-1拮抗剂SB-612111后消失。Western印迹法结果显示，与溶剂组相比，Ro 64-6198 1 mg·kg^-1处理使线索暴露后VTA中p-CREB及BDNF蛋白表达水平显著升高。免疫荧光结果显示，与溶剂组相比，Ro 64-6198 1 mg·kg^-1处理使酪氨酸羟化酶阳性多巴胺能神经元中NOPR及p-CREB表达水平升高，而小清蛋白阳性γ-氨基丁酸能神经元中NOPR表达无显著变化。结论 NOPR激动剂抑制海洛因奖赏效应、奖赏动机及由条件性线索或海洛因引燃所诱导的复吸行为。NOPR激活可能通过调节VTA的CREB/BDNF信号通路，介导海洛因复吸行为。

目的  探讨羟基酪醇羟丁酸酯（HTHB）对急性睡眠剥夺致小鼠认知能力下降的改善作用及机制。方法  将雄性 C57BL/6J小鼠分为正常对照组、正常+HTHB 30、60和120 mg·kg^-1组、正常+HT 19.25、38.5和 77 mg·kg^-1组、睡眠剥夺（SD）模型组、SD+HTHB 30、60和120 mg·kg^-1组及SD+HT 19.25、38.5和77 mg·kg^-1组。除正常对照组和正常给药组外，其余各组均采用转棒睡眠剥夺仪建立72~96 h急性睡眠剥夺模型。在Y迷宫与新物体识别实验中评估多剂量效应后，选取有效剂量HTHB 60 mg·kg^-1和HT 38.5 mg·kg^-1，在视觉 辨别任务中对正常对照组、正常+HTHB 60 mg·kg^-1组、正常+HT 38.5 mg·kg^-1组、SD 模型组、SD+HTHB 60 mg·kg^-1组和SD+HT 38.5 mg·kg^-1组进行测试。小鼠的认知行为学检测包括：采用Y迷宫自发交替实验 检测空间工作记忆，采用新物体识别实验检测物体识别记忆，采用两项选择视觉辨别实验检测视觉辨别认 知加工能力；生化指标检测包括：采用ELISA检测海马组织活性氧（ROS）水平，采用萤火虫荧光素酶法检测 海马组织ATP含量。结果  HTHB及羟基酪醇对正常状态小鼠的活动水平和空间工作记忆、物体识别记忆、 视觉辨别认知加工能力均无显著影响。与对照组相比，模型组小鼠出现自发交替率显著降低、新物体识别 指数显著降低、视觉辨别正确率在睡眠剥夺48和96 h时间点显著降低，海马组织ROS水平显著升高、ATP 含量显著减少。与模型组相比，模型+羟基酪醇38.5和77 mg·kg^-1组小鼠自发交替率显著升高，而其他检测 指标均无显著性差异；模型+HTHB 60和120 mg·kg^-1组小鼠自发交替率显著升高、新物体识别指数显著升 高，模型+HTHB 60 mg·kg^-1组视觉辨别正确率在48和96 h时间点显著升高、海马组织ROS水平显著降低、 ATP含量显著增加。结论 HTHB能够改善急性睡眠剥夺所致小鼠空间工作记忆、物体识别记忆、视觉辨别认 知加工能力下降，增强线粒体抗氧化及能量代谢可能是其发挥药理作用的机制之一。

目的  探究肺组织磷脂及其磷脂酶A2（PLA2）分解产物溶血磷脂和脂肪酸对小鼠的急性肺损伤效应。方法  将小鼠随机分为① 溶剂对照组和PLA2组；② 溶剂对照组、甘油磷脂二油酰基磷脂酰丝氨酸（DOPS）组、二棕榈酰基磷脂酰丝氨酸（DPPS）组、二油酰基磷脂酰乙醇胺（DOPE）组、二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺（DPPE）组、二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）组和1-硬脂酰基-2-油酰基磷脂酰胆碱（SOPC）组；③ 溶剂对照组、脂肪酸棕榈酸组和油酸组；④ 溶剂对照组、溶血磷脂1-油酰基-sn-甘油-3-磷酸丝氨酸（18∶1 LysoPS）组、1-十八烷酰基-sn-甘油-3-磷酸丝氨酸（18∶0 LysoPS）组、1-十六烷酰基-sn-甘油-3-磷酸丝氨酸（16∶0 LysoPS）组、1-十六烷酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺（16∶0 LysoPE）组和1-十六烷酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（16∶0 LysoPC）组；⑤ 溶剂对照组、PLA2组、DPPC组、棕榈酸组、16∶0 LysoPC组、16∶0 LysoPS组和18∶1 LysoPS组。小鼠麻醉后，溶剂对照组、PLA2组和其他实验组分别雾化给予PBS、2.1 μg·kg^-1 PLA2 PBS溶液和2.5 mg·kg^-1相应物质的PBS溶液50 μL。记录分组①小鼠的死亡时间，绘制生存曲线；于给药后1 h取分组①②③④小鼠肺组织，HE染色观察组织病理学改变；于处理后2 h采用激光散斑血流成像系统检测分组⑤小鼠肺组织血流量，采用血气分析仪检测小鼠血气，采用全身体积描记系统检测小鼠肺功能；于处理后6 h采用血常规分析仪检测分组⑤小鼠血细胞。结果  与溶剂对照组相比，PLA2组肺组织表现出严重病理变化，并伴有大量炎症浸润和肺间质增厚，240 min内小鼠全部死亡；各甘油磷脂组小鼠肺泡结构清晰，肺泡壁完整且连续，肺泡腔透亮，肺泡间隔偶可见少量炎症细胞浸润；各脂肪酸组小鼠肺组织未见明显病理改变；溶血磷脂16∶0 LysoPE和16∶0 LysoPC组可见少量炎症细胞浸润，但18∶1 LysoPS、18∶0 LysoPS和16∶0 LysoPS组肺组织出现斑块状出血、肺泡间质性水肿、肺泡壁厚度增加、中性粒细胞数量增多等病理改变。与溶剂对照组相比，16∶0 LysoPS组和18∶1 LysoPS组HE结果病理评分增加；16∶0 LysoPS组肺损伤面积百分比显著升高。与溶剂对照组相比，16∶0 LysoPS组血流平均荧光强度显著下降；PLA2组动脉血氧分压显著下降；16∶0 LysoPS组和18∶1 LysoPS组动脉二氧化碳分压显著上升；16∶0 LysoPS 组呼气时间、呼吸末压力和增强呼气间歇显著上升，潮气量、呼气量和分钟潮气量显著下降； 18∶1 LysoPS 组分钟潮气量显著下降；各脂质和PLA2雾化后小鼠血中，除16∶0 LysoPS组的中性粒细胞浓度与对照组相比有显著差异（但仍处于正常范围）外，其余炎症细胞浓度均无显著性变化。结论  肺组织磷脂及其PLA2分解产物脂肪酸均不引发小鼠严重肺损伤，而分解产物溶血磷脂，尤其溶血磷脂酰丝氨酸，能引发较为明显的肺损伤。

目的  探究可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）刺激剂sGC003改善小鼠高原肺水肿（HAPE）的作用及机制。方法  将小鼠随机分为正常对照组、模型组、模型+地塞米松4 mg·kg^-1组（前6 d ig给予生理盐水，第7和第8天 ig给予地塞米松4 mg·kg^-1）、模型+利奥西呱10 mg·kg^-1组（造模前ig给药，每天1次，连续7 d）、模型+sGC003 5和10 mg·kg^-1组（造模前 ig给药，每天1次，连续7 d）。除正常对照组外，其余各组第7天给药1 h后，气管滴注脂多糖 4 mg·kg^-1，置于低氧环境诱导HAPE模型。造模24 h后，测定小鼠呼气时间、吸气末间隙，以及增强呼气间歇和呼吸频率；HE染色观察肺组织病理变化并计算肺组织湿/干重比（W/D）；免疫荧光染色检测肺组织中白细胞介素1β（IL-1β）水平；Western印迹法检测肺组织中血管扩张刺激磷蛋白（VASP）磷酸化水平；ELISA检测血清中sGC、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、环磷酸鸟苷（cGMP）、IL-6和IL-1β含量。结果  与正常对照组相比，模型组肺组织W/D和IL-1β水平及呼气时间、吸气末间隙、增强呼气间歇，以及血清IL-1β、HIF-1α和IL-6水平均显著升高，呼吸频率、血清sGC和cGMP水平显著降低。与模型组相比，模型+地塞米松4 mg·kg^-1组和模型+sGC003 10 mg·kg^-1组呼气时间、吸气末间隙、增强呼气间歇、肺组织W/D和IL-1β水平及血清中IL-1β、HIF-1α和IL-6水平均显著降低；模型+地塞米松4 mg·kg^-1组呼吸频率和血清sGC水平显著升高；模型+sGC003 10 mg·kg^-1组呼吸频率、血清sGC和cGMP水平及肺组织VASP蛋白磷酸化水平显著升高；模型+利奥西呱10 mg·kg^-1组肺组织W/D、血清IL-1β和HIF-1α水平显著降低，血清sGC水平显著升高。结论  sGC003可改善HAPE小鼠模型肺功能，通过激活sGC/cGMP通路抑制肺组织炎症，降低肺水肿程度。

目的  探究溶酶体相关膜蛋白2b（Lamp2b）修饰对工程化外泌体疫苗黏膜免疫效果的影响。方法  体外实验：构建Lamp2b-新型冠状病毒S蛋白受体结合域（RBD）融合蛋白质粒，并转染小鼠树突状细胞系DC2.4细胞，采用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测细胞中Lamp2b-RBD表达水平，流式细胞术评价Lamp2b-RBD细胞阳性率，免疫荧光染色观察Lamp2b-RBD细胞定位；超速离心法提取外泌体，透射电镜和纳米粒子示踪分析仪分别测定外泌体的形态和粒径分布；Western印迹法验证外泌体中标志蛋白〔分化群抗原9（CD9）、CD63、程序性细胞死亡6相互作用蛋白（Alix）、高尔基体蛋白亚家族A成员2（GM130）〕和Lamp2b-RBD重组蛋白表达。体内实验：①将雌性BALB/c小鼠分为Lamp2b-RBD-Exo组和脂质纳米粒（LNPs）组，通过气管给药进行黏膜免疫，免疫荧光染色评估肺组织滞留能力；②将雌性BALB/c 小鼠分为安慰剂组（PBS组）、Lamp2b-RBD-Exo气管给药组、Lamp2b-RBD-Exo肌肉注射组，于第0和第14天进行接种，第7和第21天通过酶联免疫吸附试验测定血清中RBD 特异性免疫球蛋白G（IgG）、肺泡灌洗液中RBD 特异性IgA和IgG 抗体的滴度。结果  体外实验：Lamp2b-RBD的阳性细胞率为71.16%，Lamp2b-RBD基因表达量较细胞对照组上调1 979倍，且Lamp2b-RBD重组蛋白成功表达在细胞膜；提取的工程化外泌体形态规整，粒径大小约124 nm，高表达阳性标记物CD9、CD63和Alix，不表达阴性标记物GM130，每109个外泌体携带3 009 pg RBD蛋白。体内实验：给药4 h后，Lamp2b-RBD-Exo组和LNPs组小鼠肺组织均出现荧光信号，24 h后LNPs组荧光信号转移至肝，Lamp2b-RBD-Exo组荧光信号由气管向细支气管及肺组织扩散，分布与滞留能力显著优于LNPs组；免疫7 d后，Lamp2b-RBD-Exo气管给药组和Lamp2b-RBD-Exo肌肉注射组均能诱导RBD特异性的IgG抗体滴度，免疫21 d后，Lamp2b-RBD-Exo引起更高水平的RBD特异性免疫应答，其血清中IgG滴度达1∶8 100，肺泡灌洗液IgA滴度达1∶300；Lamp2b-RBD-Exo肌肉注射组未在肺泡灌洗液中未检测到RBD特异性的IgA抗体滴度。结论  Lamp2b-RBD修饰可成功负载RBD蛋白并增加工程化外泌体在肺实质部位的滞留能力，诱导抗原特异性黏膜免疫应答。

神经炎症通过NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎症小体过度激活在阿尔茨海默病、缺血性脑卒中、创伤性脑损伤等神经系统疾病中驱动神经元损伤。NLRP3炎症小体由NLRP3受体蛋白、凋亡相关斑点样蛋白和胱天蛋白酶1组成，经经典途径或非经典途径活化后会释放白细胞介素1β和白细胞介素18并诱导细胞焦亡。临床证据表明，阿尔茨海默病患者脑内凋亡相关斑点样蛋白与β淀粉样蛋白共定位，多发性硬化症患者单核细胞NLRP3特异性上调，脑卒中患者血清NLRP3水平与梗死体积正相关，提示其可作为关键治疗靶点。本文对NLRP3炎症小体在神经系统疾病中的作用和靶向NLRP3炎症小体的神经系统疾病候选新药研究进展进行总结，其靶向策略包括直接抑制剂、上游调控剂和下游阻断剂。但由于血脑屏障、模型局限性和脱靶毒性等挑战，靶向NLRP3炎症小体小分子抑制剂的临床转化仍存在局限性，而纳米载体、AI辅助设计及新靶点探索目前研发的突破方向。未来需结合类器官模型与精准分型，推动其临床转化。