论著
范紫微， 古 虹， 邹天琪， 柏 琳， 孙靖辉， 张成义
目的 观察五味子木脂素（SCL）对佐剂性关节炎（AA）大鼠的抗炎作用，并探讨其自噬相关抗炎作用机制。方法 大鼠右后足足跖皮下注射弗氏完全佐剂0.2 mL，足肿胀度≥0.8 mL为造模成功。第1天（D1）开始，大鼠ig给予地塞米松（Dex）0.25 mg·kg-1或SCL 25，50和100 mg·kg-1，持续28 d。测量D0和D28大鼠体质量，观察D1，D21和D28足跖形态。排水法检测足跖肿胀度；检测胸腺和脾指数；HE染色观察大鼠关节组织病理形态并分别半定量检测炎症细胞、滑膜组织增生和OOCHAS评分；RT-PCR法检测足跖滑膜组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6、IL-17、环氧合酶1（COX-1）和COX-2 mRNA表达水平；RT-PCR法和Western 印迹法检测足跖滑膜组织中腺苷酸激活蛋白激酶（AMPK）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、Beclin1、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）、自噬相关基因5（ATG5）、ATG7和ATG12基因及蛋白的表达。结果 与正常对照组相比，模型组体质量明显下降（P<0.01）；模型组炎症细胞、滑膜组织增生和OOCHAS评分显著升高（P<0.01）；COX-1，COX-2，TNF-α，IL-1β，IL-6和IL-17 mRNA表达显著升高（P<0.05，P<0.01），AMPK，Beclin1和ATG12 mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01），mTOR mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01），LC3-Ⅱ，ATG5和ATG7 mRNA表达显著降低（P<0.05，P<0.01）。与模型组相比，模型+SCL 50和100 mg·kg-1组体质量显著增加（P<0.01）。D1大鼠足跖红肿明显，D21继发性炎症达到高峰。模型+SCL 50和100 mg·kg-1组大鼠滑膜组织炎症细胞明显减少（P<0.05，P<0.01），滑膜组织增生显著减轻（P<0.05，P<0.01），OOCHAS评分显著降低（P<0.01）；模型+SCL 25，50和100 mg·kg-1组胸腺指数明显降低（P<0.01）；模型+SCL 50和100 mg·kg-1组脾指数明显降低（P<0.05，P<0.01）；模型+SCL 50和100 mg·kg-1组关节软骨损伤明显改善（P<0.01）；模型+SCL 25，50和100 mg·kg-1组COX-1 mRNA表达无显著差异，模型+SCL 100 mg·kg-1组 COX-2，TNF-α和IL-17 mRNA表达明显降低（P<0.05），模型+SCL 50，100 mg·kg-1组IL-1β和IL-6 mRNA表达明显降低（P<0.05，P<0.01）；模型+Dex组COX-1 mRNA表达无显著差异，COX-2，TNF-α，IL-1β，IL-6和IL-17 mRNA表达显著降低（P<0.05，P<0.01）；模型+SCL 50和100 mg·kg-1组AMPK，Beclin1，LC3-Ⅱ，ATG5和ATG7 mRNA表达显著升高（P<0.05，P<0.01），模型+SCL 100 mg·kg-1组mTOR mRNA 表达显著降低（P<0.05），ATG12 mRNA 表达水平显著升高（P<0.01）；模型+SCL 100 mg·kg-1组AMPK，Beclin1，LC3-Ⅱ，ATG5和ATG7蛋白表达显著升高（P<0.05，P<0.01），模型+SCL 25，50和100 mg·kg-1组mTOR蛋白表达显著降低（P<0.05，P<0.01），ATG12表达明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论 SCL对佐剂性关节炎大鼠炎症反应有抑制作用，其机制可能与促进关节滑膜细胞自噬相关。
