目的 考察西达本胺对结肠癌细胞 HCT-8和 HT-29能量代谢调节的作用。方法 西达本胺 5， 10和20 μmol· L-1分别处理HCT-8和HT-29细胞， 普通光学显微镜观察细胞形态变化， MTT法检测细胞存活，荧光细胞活性试剂盒检测ATP含量， 糖酵解压力试剂盒检测代谢变化， 荧光定量PCR和Western蛋白印迹法分别检测糖酵解关键酶乳酸脱氢酶 A（LDH-A）在 mRNA水平和蛋白水平的表达。结果 与对照组相比，西达本胺处理组 HCT-8 和 HT-29 细胞形态不规则， 出现变形、 皱缩和细胞碎片， 增殖抑制率显著升高（P<0.05）； 西达本胺 5 和 10 μmol · L- 1 处理 16 h， HCT- 8 和 HT- 29 细胞内 ATP 总含量均无差异， 而20 μmol·L-1处理组ATP总含量显著降低 （P<0.05）。西达本胺20 μmol·L-1处理HCT-8和HT-29细胞16 h，有氧呼吸水平均无差异， 而糖酵解ATP产生速率分别降低30.7%和37.9% （P<0.05）； LDH-A mRNA水平无差异，蛋白水平显著下调（P<0.01）。结论 西达本胺具有抑制结肠癌细胞糖酵解能力的作用， 可能与下调LDH-A有关。
目的 探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯 （MEHP） 对原代神经干细胞 （NSC） 和NE-4C小鼠细胞增殖和迁移的影响。方法 原代 NSC来源于孕 15 d（E15）远交群 SD胎大鼠脑皮质； NE-4C细胞为小鼠 NSC。MEHP 0， 1， 10， 100和 1000 μmol•L-1处理 72 h后， CCK-8法检测细胞活力； 5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷（EdU）法检测细胞增殖能力； Transwell 小室检测细胞迁移； Western 蛋白印迹法检测糖皮质激素受体（GR）、 Y性别决定区框 2（Sox2）、 信号传导与转录激活因子 3（Stat3）等基因及蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示， 与正常对照组相比， MEHP1000 μmol•L-1作用72 h后， NE-4C和NSC细胞活力明显减弱， 分别为正常对照组的70.3%和40.0%。EdU结果显示， 与正常对照组相比， MEHP 100 μmol•L-1组细胞增殖率降低，分别为正常对照组的 74.8%和 12.0%（P<0.05）。Transwell 实验发现， MEHP 100 μmol•L-1处理 72 h 后，NE-4C细胞的迁移率降低至 （63.4±2.0） % （P<0.05）。MEHP 100 μmol•L-1组NE-4C中与增殖和迁移相关的基因GR， Stat3和Sox2的表达下调， 分别为正常对照组的49.8%， 26.0%和14.0% （P<0.05）； 在NSC中的相应基因也下调， 分别为正常对照组的10.0%， 14.0%和15.3%； 在NE-4C中与增殖及迁移相关的蛋白GR， GRβ，p-Stat3和Sox2的表达下调， 相对表达量分别为0.92±0.17， 0.87±0.35， 0.62±0.24和0.81±0.22 （P<0.05）； 在NSC中相应蛋白表达也下调， 相对表达量分别为0.82±0.20， 0.56±0.12， 0.53±0.20和0.84±0.36 （P<0.05）。结论 大剂量MEHP可抑制NSC的增殖和迁移能力， 其机制可能是通过GR介导的Stat3及Sox2的作用实现。
目的 探讨亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆能力和 c-Fos 表达的影响， 探索铝对大鼠认知功能损害的毒性作用及机制。方法 Wistar 子代大鼠自出生之日起， 分别通过乳汁或饮水染毒 AlCl3 2.0， 4.0和8.0 g∙L-1 连续3个月。Morris 水迷宫法检测子代大鼠的学习记忆能力， 石墨炉原子吸收光谱法检测子代大鼠海马铝含量， HE染色观察海马 CA1区神经细胞形态， RT-PCR法检测子代大鼠海马 CA1区c-fos基因表达， 免疫组化法检测 CA1区 c-Fos蛋白表达。结果 染 AlCl3组子代大鼠学习记忆能力明显低于对照组（P<0.05， P<0.01）， 海马的铝含量高于对照组（P<0.01）， 其海马 CA1区神经细胞呈现神经纤维稀疏、 神经元细胞脱失甚至空泡样变性等病理改变； 染 AlCl3 4.0和 8.0 g∙L-1组子代大鼠海马c-fos mRNA表达水平分别低于对照组和染AlCl3 2.0 g∙L-1组 （P<0.01）。染AlCl3组子代大鼠CA1区c-Fos蛋白表达水平低于对照组 （P<0.01）。结论 亚慢性铝暴露损害大鼠学习记忆能力的机制可能与AlCl3造成海马CA1区神经细胞病理学改变、 功能减弱以及c-Fos表达水平降低有关。
目的建立稳定表达人源α2A-肾上腺素能受体（α2A-AR）的细胞系。方法将带有潮霉素B （Hygro）抗性的 α2A-AR （pcDNA3.1/Hygro-HA-α2A-AR）重组质粒通过脂质体介导转染至已表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记的蛋白激酶A催化亚基（PKAcat）的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞（以Hygro 200 mg·L-1进行压力筛选后，采用PKA重分布实验筛选阳性克隆），然后使用实时定量PCR验证α2A-AR受体在转录水平的表达，最后以时间分辨荧光共振能量转移免疫实验检测cAMP含量以鉴定受体功能。结果 PKA重分布实验结果表明， CHO-PKAcat-α2A-AR 7号克隆反应性良好；与CHO-PKAcat-EGFP细胞相比，该细胞系α2A-AR mRNA表达水平较高（P<0.01），且多次传代能保持稳定；在α2A-AR激动剂作用后，能显著抑制forskolin引起的cAMP水平升高（P<0.01）。结论成功构建稳定表达α2A-AR的CHO-PKAcat-α2A-AR细胞系，可用于药物筛选及机制研究。
目的通过注射猪甲状腺球蛋白（PTG）制备小鼠毒性弥漫性甲状腺肿（GD）模型，探索其模型发病率及稳定性。方法模型组C57BL6/N小鼠每只每周皮下多点注射PTG 25 μg，共计6次。免疫攻击完成后测量心率和耗氧量；之后每2周进行血清三碘甲腺原氨酸（T3）水平的测定，以模型组小鼠血清T3水平高于正常对照组小鼠T3的x+3s为造模成功，共计12周。第12周实验结束时处死小鼠测定脾和胸腺指数、血清甲状腺球蛋白抗体和甲状腺过氧化物酶抗体，并对甲状腺组织进行病理观察。结果 PTG免疫6次后，与正常对照组小鼠相比，模型组小鼠心率加快（P<0.01），耗氧量增多（P<0.01），血清 T3水平升高（P<0.01），其雄鼠发病率约为77.7%，雌鼠发病率约为88.8%。在免疫结束后的12周内，模型组血清T3水平始终高于正常对照组，雄性模型组T3水平有下降趋势，而雌性模型组血清T3始终保持相对稳定的高水平状态。结论本法制备小鼠GD模型造模时间短，发病率高，持续时间长，是较为理想的GD造模方法。
核转录因子E2相关因子（Nrf2）和抗氧化反应元件（ARE）结合可启动多种抗氧化、抗炎蛋白和解毒酶的表达。Nrf2/ARE信号通路在机体抗氧化和抗外源有毒化学物损伤过程中发挥着重要的作用，不仅参与调节营养物质代谢等生理过程，也参与多种疾病的发病过程。本文综述了 Nrf2/ARE的生物学结构和功能及其信号通路调控的分子机制。
近年来，人们对中药的不良反应日趋重视。蟾酥作为临床广泛应用和已知的具有心脏毒性的名贵中药，人们迫切希望明确其毒性机制以及与血药浓度的关系。蟾酥中主成分之一蟾蜍甾烯类物质的化学结构与地高辛类似，也属于强心苷类化合物。它具有兴奋和抑制心脏的双重效果，在低剂量时可兴奋心肌导致心动过速和快速心律失常，而在高剂量时可抑制心肌导致传导阻滞和缓慢心律失常。Na+-K+-ATP酶作为调节心肌能量和细胞内钙离子浓度的枢纽，蟾蜍甾烯类物质通过结合酶的α亚基可产生抑制作用，从而导致心肌细胞钙超载和能量紊乱，这可能是蟾酥心脏毒性的主要机制。本文分别从心脏毒性物质基础、整体动物实验、酶和离子通道、脂质代谢和离子稳态、药动学与心脏毒性的相关性等方面综述蟾酥心脏毒性的研究进展。
