中国药理学与毒理学杂志

过刊目录

  • 全选
    |
    论著
  • 论著
    布洛芬对淀粉样β蛋白片段1~40引起的大鼠海马p38 MAP激酶信号传导通路及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶级联的影响
    范 莹;金 英;闫恩志;杨 菁;宗志红;齐志敏
    2007, 21(2): 81-89.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 研究布洛芬对淀粉样β蛋白片段1-40 (Aβ1-40)所致大鼠海马损伤的保护作用及作用机制。方法 大鼠ig给予布洛芬15 mg·kg-1，连续应用3周，脑室内一次性注射Aβ1-40 5 μL, 1 mmol·L-1，注射后6 h快速取海马CA1区，Western免疫印迹法观察磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶的激酶3/6（MKK3/MKK6）、磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶p38（p38 MAP 激酶）、磷酸化MAPK活化的蛋白激酶2（MAPKAPK2）、磷酸化热休克蛋白p27（Hsp27）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）9, 3, 7以及ADP-核糖聚合酶(PARP)的蛋白表达水平的改变。结果 脑室内注射Aβ1-40可引起海马CA1区磷酸化的MKK3/MKK6和磷酸化p38 MAP激酶表达明显增加, 但可使磷酸化MAPKAPK2和磷酸化的Hsp27表达降低，这些改变伴随有caspase级联的激活。此外，也发现Aβ1-40可使海马CA1区完整的PARP蛋白表达明显减少，而劈切PARP（分子量为89 ku）表达明显增加。布洛芬可明显对抗Aβ1-40引起的磷酸化的MKK3/MKK6和磷酸化p38 MAP激酶表达增加，上调磷酸化MAPKAPK2和磷酸化的Hsp27表达水平，同时抑制Aβ1-40引起的caspase级联激活和PARP的劈切。结论 布洛芬通过抑制Aβ1-40引起的磷酸化的MKK3/MKK6和磷酸化p38 MAP激酶表达，明显增加以及上调磷酸化的Hsp27表达水平，对抗Aβ1-40引起的海马的神经细胞损伤。
  • 论著
    杂色曲霉素对小鼠穹隆下器官TNFα和TGFβ2的 mRNA表达的影响
    郝庆卯;张祥宏;严 霞;邢凌霄;王俊灵;薛丽英;申海涛;刘惠民;邢 欣
    2007, 21(2): 134-136.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 观察杂色曲霉素(ST)损伤脑组织时有无肿瘤坏死因子（TNF）α和转化生长因子（TGF）β2的mRNA表达的改变。方法 用BALB/c小鼠，ST 3 mg·kg-1灌胃，分别于灌胃后0.5，1，2，4，8和16 h处死动物，用原位杂交方法观察穹隆下器官（SFO）细胞TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA的表达。结果 TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA阳性细胞广泛分布在SFO.ST处理组从0.5 h开始TNFα mRNA阳性表达细胞数缓慢上升，4 h达到顶点，之后缓慢下降；TGFβ2 mRNA阳性表达细胞数从0.5 h缓慢持续上升，16 h达到顶点。ST组各时间点TNFα mRNA和TGFβ2 mRNA阳性细胞数均明显高于对照组。结论 TNFα和TGFβ2在ST对SFO细胞损伤和修复中可能起着重要的作用。
    • 综述
  • 综述
    组蛋白去乙酰化酶抑制剂治疗血液系统肿瘤的作用机制及临床应用
    董喜凤;宋 强
    2007, 21(2): 157-160.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDAI）使组蛋白和非组蛋白乙酰化，然后通过多条细胞内途径诱导血液肿瘤细胞的凋亡和分化，并使细胞周期阻滞，以抑制血液肿瘤细胞增殖，发挥治疗恶性血液病的作用。HDAI治疗血液系统肿瘤作用机制的研究推动了其临床试验的进展。本文介绍了国外近年来HDAI治疗血液系统肿瘤作用机制及临床应用的研究进展。
    • 实验方法
  • 实验方法
    流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能
    黄 琼;李 志;杨杏芬;黄俊明;黄建康;蔡 玟
    2007, 21(2): 140-146.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 确立采用流式细胞仪检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的实验条件，以提供一种快速、准确和敏感的方法评价保健食品对吞噬功能的影响。方法 取昆明种小鼠巨噬细胞，与荧光素标记大肠杆菌于37℃避光孵育1.5 h，与荧光微球于4℃，25℃及37℃避光孵育1.5 h或于37℃避光孵育0.5，1.0，1.5和2 h后，用流式细胞仪观察和分析腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球或荧光素标记大肠杆菌的能力。吞噬百分率(PP)表示吞噬一个或多个荧光微球的巨噬细胞占巨噬细胞总数的百分比；吞噬指数（PI）表示平均每个巨噬细胞吞噬荧光微球的数量；或吞噬荧光素标记大肠杆菌实验中，在M1处每个巨噬细胞的平均荧光强度（FI）。为验证和确定实验条件的可靠性，取昆明种小鼠每日经口分别给予蛹虫草菌丝体或灵芝孢子油30 d后，取腹水巨噬细胞，分别与荧光微球或荧光素标记E.coli k-12于37℃,培养1.5 h后用流式仪进行吞噬功能的检测。结果 25℃及37℃孵育条件时，PP分别为（28.0±1.4）％和（44.0±3.3）％，显著高于4℃的结果；1.5 h及2.0 h孵育时间，PP分别为（34.9±4.0）％和（39.5±11.3）％，显著高于0.5h及1.0 h的结果。25~37℃孵育1.5~2.0 h是合适的孵育条件。37℃孵育未加重组小鼠IFN-γ（rmIFN-γ)刺激时，PP为33.8％，PI为1.80，经rmIFN-γ处理后，PP为73.6％，PI为2.64，吞噬功能明显增强。0.15, 0.30及0.90 g·kg-1蛹虫草菌丝体处理组PP和0.30及0.90 g·kg-1蛹虫草菌丝体处理组PI均较阴性对照组显著提高。0.33和1.00g·kg-1灵芝孢子油处理组M1处的FI显著高于阴性对照组。结论 流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能是一种灵敏、简便、准确而高通量的定量评价保健食品影响吞噬功能的方法。
    • 综述
  • 综述
    胆汁酸代谢相关核受体的研究进展
    李小林;朱心强
    2007, 21(2): 152-156.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    胆汁酸是胆固醇代谢的主要终产物，也是肝和小肠对食物中的脂类进行分解、吸收与转运的重要成分。体内多种核受体参与胆汁酸的代谢调节，如法呢醇受体、孕烷X受体、组成性雄烷受体、维生素D受体、肝X受体α、过氧化物酶体增殖物激活受体等。核受体调节胆汁酸代谢的研究近年来已成为国内外研究的热点，研究胆汁酸代谢相关的核受体，对于了解胆汁酸代谢的调节机制，指导胆汁酸代谢相关疾病的临床合理用药以及探索新药等方面有重要意义。
    • 论著
  • 论著
    4-［4″-(2″, 2″, 6″, 6″-四甲基-1″-哌啶氮氧自由基)氨基］-4′-去甲表鬼臼毒素对K562/ADM细胞的抑制作用
    陈 焱;齐社宁
    2007, 21(2): 107-112.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 比较4-［4″-(2″, 2″, 6″, 6″-四甲基-1″-哌啶氮氧自由基)氨基］-4′-去甲表鬼臼毒素（GP-7）对多药耐药人慢性粒细胞白血病K562的多柔比星耐药株细胞（K562/ADM细胞）的抑制作用是否优于依托泊苷。方法 以依托泊苷和K562细胞为对照，用不同浓度GP-7处理K562/ADM细胞不同时间，MTT比色法测定细胞增殖，流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡率，普通光学显微镜观察细胞凋亡形态，琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA凋亡性降解。结果 8～128 mol·L-1 GP-7处理48 h或64 μmol·L-1 GP-7处理24～72 h，GP-7对K562/ADM细胞的增殖抑制呈剂量依赖性（r=0.947，P＜0.05)和时间依赖性(r=0.999，P＜0.01)。GP-7及依托泊苷对K562/ADM的IC50分别为(45.9±1.8)及(68.7±4.6)μmol·L-1；64 μmol·L-1 GP-7作用48 h可使G2/M期细胞明显增多，相同情况下依托泊苷则使S期细胞明显增多；GP-7可引起K562/ADM和K562细胞凋亡，但其引起的K562/ADM和K562细胞凋亡率与依托泊苷无明显差异；GP-7可引起K562/ADM和K562细胞典型的凋亡形态学变化和DNA凋亡性降解，但GP-7引起的K562/ADM细胞DNA凋亡性降解弱于K562细胞；128及256 μmol·L-1 GP-7或依托泊苷处理K562/ADM和K562细胞48 h，GP-7诱导DNA凋亡性降解的作用强于依托泊苷，但32和64 μmol·L-1时作用则相反。结论 GP-7可抑制多药耐药白血病细胞株K562/ADM的增殖,诱导细胞凋亡。GP-7抑制多药耐药白血病细胞株K562/ADM的作用优于依托泊苷。
  • 论著
    吡格列酮对大鼠尿酸钠晶体诱导的炎症组织细胞中S100A8和S100A9的mRNA表达的影响
    黄火高;胡 明;王建和;韩春光;施海燕;刘永学
    2007, 21(2): 113-117.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 为进一步了解吡格列酮的抗炎机制，观察其对炎症组织细胞中免疫及炎性调节因子S100A8和S100A9的mRNA表达的影响，探讨其痛风防治作用机制。方法 大鼠单侧踝关节腔一次性注射尿酸钠（MSU）晶体建立急性痛风性关节炎模型；腹腔一次性注射MSU诱导急性腹膜炎模型。MSU注射诱发模型前3 d，大鼠灌胃口服吡格列酮(20 mg·kg-1·d-1)，连续给药5 d；模型诱发当天，在吡格列酮给药后2 h注射MSU。以RT-PCR检测关节炎诱发后48 h滑膜组织中和腹膜炎诱发后4，8，24，48及72 h腹腔巨噬细胞S100A8和S100A9的mRNA的表达以及吡格列酮给药的影响。结果 S100A8和S100A9的mRNA在正常大鼠滑膜中仅有微量表达(0.01±0.01, 0.20±0.07)，但在诱发关节炎后48 h, 滑膜组织中呈现高表达(1.21±0.20, 1.44±0.20)，吡格列酮则显著抑制其高表达(0.26±0.14, 0.25±0.16)。S100A8和S100A9的mRNA在正常大鼠腹腔巨噬细胞未见表达，但在诱发腹膜炎后4，8，24，48和72 h大鼠腹腔巨噬细胞中均有较高表达。吡格列酮仅在48和72 h显示出明显的抑制作用(S100A8 mRNA: 1.17±0.38 vs 0.03±0.02和0.70±0.20 vs 0.02±0.01; S100A9mRNA: 0.90±0.31 vs 0.10±0.01和 0.77±0.10 vs 0.02±0.01)。结论吡格列酮具有抑制S100A8和S100A9的mRNA表达的作用，很可能与其对痛风炎症的防治作用密切相关。
  • 论著
    多沙唑嗪对映体不同给药途径对豚鼠膀胱排尿功能的影响
    田河林;任雷鸣 （河北医科大学药学院药理学研究室;河北 石家庄〓000
    2007, 21(2): 118-123.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 比较多沙唑嗪（rac-DOX）及其对映体S-DOX和R-DOX对膀胱排尿功能的影响。方法 采用八道生理记录仪连续记录给药前及给药后麻醉豚鼠膀胱排尿压(VMP)、排尿阈值压(MTP)、排尿间隔(ICI)的变化，并测量排尿量(VMV)。结果 S-DOX, R-DOX和rac-DOX（0.08～2.40 mg·kg-1，经十二指肠插管给药），均可剂量依赖性降低VMP；S-DOX对MTP, ICI及VMV无显著影响；R-DOX则可显著降低MTP；R-DOX和rac-DOX均显著缩短ICI，并减少VMV。S-DOX,R-DOX和rac-DOX（0.008～0.800 mg·kg-1，iv），亦可剂量依赖性降低麻醉豚鼠VMP；三者对VMP的作用强度无显著性差异；S-DOX,R-DOX和rac-DOX对MTP无显著影响；S-DOX 和 R-DOX能显著延长ICI，并增加VMV。结论 与R-DOX和rac-DOX相比，S-DOX在保留了原有降低VMP作用的同时，对MTP，ICI及VMV无不良影响。
  • 论著
    西格列他钠的体外代谢
    闫亮平;窦桂芳;朱晓霞;甘 慧;孙文种;孟志云 （军事医学科学院野战输血研究所药物代谢与药代动力学研究室;北京 00
    2007, 21(2): 124-130.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 研究拟治疗2型糖尿病的创新化合物西格列他钠（chiglitazar）的体外代谢速率、代谢酶和代谢转化，为临床应用提供参考。方法 采用高效液相紫外检测(HPLC-UV)的方法测定肝微粒体孵育液中西格列他钠的浓度，用特异性抑制剂的方法分析化合物的代谢酶，用大鼠肝微粒体体外研究西格列他钠可能的代谢产物和代谢途径。结果 建立了可靠的测定大鼠肝微粒体中西格列他钠的HPLC 分析方法；体外半衰期方法求得西格列他钠的t1/2为27.2 min，固有清除率（Clint）为50.9 mL·min-1·g-1蛋白；代谢酶研究表明，西格列他钠主要被P450酶中的CYP3A亚型代谢；西格列他钠在大鼠肝微粒体中的代谢主要为羟基化和O-脱烷基化，采用LC/MS n分析共发现了8个代谢物。结论 西格列他钠是代谢活跃的化合物，有必要研究代谢产物的活性及临床注意药物相互作用。
  • 论著
    黄曲霉毒素G1对体外原代培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响
    申海涛;吕 平;张祥宏;邢 欣;邢凌霄;严 霞;王俊灵
    2007, 21(2): 99-106.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 进一步研究黄曲霉毒素G1(AFG1)对可能作用的靶细胞——SD大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AT-Ⅱ)损伤的生物学作用。方法 以酶消化法原代培养SD大鼠AT-Ⅱ，纯化后培养36 h，分别给予不同浓度(0.5, 1.0 和2.0 mg·L-1)的AFG1处理。AFG1作用24 h后，收集细胞和培养基上清 液及细胞爬片，采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率、生物化学方法检测细胞培养上清液乳 酸脱氢酶(LDH)和碱性磷酸酶(AKP)活力、透射电镜方法观察AT-Ⅱ超微结构的改变、激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)检测Fluo-3/AM负载细胞内钙离子浓度（［Ca2+ ］i）、免疫细胞化 学、CLSM及流式细胞术(FCM)方法检测AT-Ⅱ特异分化标志物肺表面分泌蛋白C(SP-C)表达情况。结果 给予不同浓度AFG1处理后，体外培养AT-Ⅱ细胞存活率分别为(88±3)%，(80±9)%和(72±8)%，明显低于溶剂对照组(101±2)%(n=6，P<0.01)；培养上清液中LDH和AKP活力明显增高；透射电镜观察可见上皮细胞板层小体出现空化，线粒体肿胀、空泡化等损伤性变化。CLSM结果显示，AFG1 0.5, 1.0 和2.0 mg·L-1处理组，AT-Ⅱ细胞内平均钙离子荧光强度分别为200±21，225±14和229±12，明显高于溶剂对照组161±28 (n=6，P<0.01)，有明显浓度依赖关系(r=0.849)；免疫细胞化学、CLSM及FCM检测结果显示AFG1处理组AT-Ⅱ SP-C蛋白表达明显低于溶剂对照组。结论 AFG1对体外培养的大鼠AT-Ⅱ具有明显致损伤作用，同时增加细胞［Ca2+ ］i、降低SP-C蛋白的表达。
  • 论著
    麦冬不同提取部位对过氧化氢所致血管内皮细胞损伤的保护作用
    范 俊;张小燕;张志杰;梁侨丽;陆兔林;蔡宝昌;张 旭
    2007, 21(2): 131-133.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏

    目的 观察麦冬不同提取部位对H2O2致血管内皮细胞损伤的保护程度是否不同。方法 分别用正丁醇、水和氯仿提取麦冬。含终浓度为12.9 mg·L-1的各提取部位与H2O2 100 μmol·L-1共同作用于培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）24 h，流式细胞仪测定细胞的凋亡率，并测定上清培养液中超氧化物歧化酶（SOD）活性和脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量。结果 麦冬3个提取部位均能减少HUVEC凋亡，其中正丁醇提取部位作用更强些。3个部位均能提高细胞培养液中SOD活性；正丁醇和氯仿提取部位能降低MDA含量。结论 麦冬正丁醇、水和氯仿提取部位均可不同程度地保护HUVEC。

    • 实验方法
  • 实验方法
    表面等离子共振技术测定药物与人血清白蛋白的相互作用
    路萍萍';孟志云;王敏伟;刘 婷';王 欣;毕学智;田慧芳;;王 慧;窦桂芳
    2007, 21(2): 147-151.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 应用表面等离子共振技术（SPR）建立一种新的测定白蛋白与化合物相互作用的方法。方法 将人血清白蛋白(HSA)固定在CM5芯片表面。不同化合物的溶液流经固定于芯片表面的HSA，SPR显示在芯片表面的折射系数变化。分析软件处理数据，用HSA流通池得到的数据减去参比池得到的数据进行拟合，确定结合常数。结果 所有测试药物与固定的HSA可逆结合。紫草素1的平衡结合常数KA为3000 L·mol-1。SPR样品需要量最小而且能够自动分析，还可以直接检测小分子(Mr308~585)结合，使之适用于评价药物与HSA相互作用。结论 HSA主要的药物键合位点没有因为被固定到芯片表面而破坏。验证了SPR可以准确简易测定化合物的结合解离。
    • 论著
  • 论著
    淀粉样β蛋白片段25～35下调大鼠海马PI3K/Akt/p70S6K信号传导通路
    金 英;范 莹;闫恩志;杨 菁;宗志红;齐志敏
    2007, 21(2): 90-98.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 探讨阿尔茨海默病（AD）的淀粉样β蛋白(Aβ)的沉积是否损害神经细胞存活的信号传导通路。方法 实验分为生理盐水对照组；Aβ25-35组；Aβ25-35 +布洛芬组；Aβ25-35+布洛芬+LY294002组；Aβ25-35+LY294002组。大鼠分别灌胃给予布洛芬7.5或15 mg·kg-1，每日1次，连续3周后，左侧脑室内注射Aβ25-35（10 μL, 1 mmol·L-1，之后继续灌胃给予布洛芬1周。PI3K特异性阻断剂LY294002（5 μL, 4 mmol·L-1在注射Aβ25-35前1 h左侧脑室内注射。注射Aβ25-35后1周，取海马CA1区，Western免疫印迹法观察P53, Bax, FasL, Bcl-2, Akt和p70S6K的蛋白表达水平。应用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3活性测定试剂盒分析caspase 3活性变化，RT-PCR方法观察p70s6k mRNA表达水平。结果 脑室内注射Aβ25-35可引起大鼠海马CA1区磷酸化Akt/PKB和磷酸化p70S6K表达明显降低，分别从对照组1.32±0.14和0.769±0.028下降到0.69±0.08和0.479±0.032。同时,海马CA1区促凋亡蛋白P53, Bax和FasL表达及caspase 3活性明显增加，抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显降低。预先注射LY294002可使caspase 3活性较单独注射Aβ25-35组进一步增加。给Aβ25-35前后连续给予布洛芬4周可明显对抗Aβ25-35引起的上述变化。LY294002可明显减弱布洛芬上调磷酸化Akt/PKB和磷酸化p70S6K表达的作用。结论 Aβ25-35引起抗凋亡通路PI3K/Akt/p70S6K下调可能参与AD的神经元损伤。布洛芬具有较好的对抗作用，这可能与上调PI3K/Akt/p70S6K通路中的一些蛋白有关。
  • 论著
    兰尼碱受体mRNA在哮喘豚鼠气道平滑肌细胞中表达的改变
    封 瑞;滕 赞;赵美眯;郝丽英;李 智
    2007, 21(2): 137-139.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    目的 明确兰尼碱受体（RyR）与哮喘发病的关系, 为哮喘的防治提供一条新的途径。方法 以酶消化法分离培养正常与哮喘豚鼠气道平滑肌细胞（ASMCs），应用RT-PCR方法测定每组细胞RyR 各亚型RyR1，RyR2和RyR3的mRNA表达。结果正常与哮喘豚鼠ASMCs中，RyR1和RyR2的mRNA均见表达，未见RyR3 mRNA的表达, 并以表达RyR2 mRNA为主。哮喘时，RyR1和RyR2的mRNA相对吸光度值分别为0.43±0.05和1.5±0.6，明显高于正常组RyR1 mRNA的吸光度值0.34±0.03(n=6, P<0.01)。结论 RyR1 mRNA表达上调可能与哮喘发病相关。