论著
张金霞, 刘伟江, 苏菲娅, 张 晗, 于丰实, 白海涛, 袁福临, 刘元林, 李 雪, 王 洋, 郑荣秀, 张 毅
目的 比较幼龄1型糖尿病（T1DM）模型小鼠和幼龄正常小鼠脂肪来源干细胞（ADSC）的成脂分化能力，为阐明T1DM发病机制提供理论基础和实验依据。方法 3周龄C57BL/6J小鼠，连续5 d ip给予小剂量（50 mg·kg-1）链脲佐菌素（STZ）制备幼龄T1DM小鼠模型；正常对照组ip给予等体积柠檬酸缓冲液；
7 d后连续3 d小鼠尾静脉采血检测空腹血糖水平，空腹血糖均值≥16.7 mmol· L-1认为幼龄小鼠T1DM建模成功。建模成功14 d后，取皮下脂肪和性腺周围脂肪组织，用组织酶消化法培养小鼠ADSC，倒置显微镜下观察细胞形态；用流式细胞术检测细胞表面标志物Sca-1、CD29、CD90、CD31、CD34、CD45、主要组织相容性复合体（MHC）Ⅱ和CD11b。选取第3代（P3代）ADSC进行成骨和成脂诱导分化，分别用油红O染色和碱性磷酸酶染色检测细胞的成骨和成脂诱导分化能力，实时荧光定量PCR检测ADSC成骨关键转录因子骨钙素（Ost）和Runt 相关转录因子2（Runx2）及成脂关键转录因子CCAAT 增强子结合蛋白α （CEBPα）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ） mRNA表达。结果 成功建立幼龄T1DM小鼠模型，并从T1DM模型小鼠脂肪组织分离获得ADSC，细胞形态呈成纤维样、贴壁生长，高表达CD29，CD90和Sca-1，低表达CD45，CD34，MHCⅡ，CD11b和CD31。幼龄T1DM模型小鼠P3代ADSC成骨诱导分化后，碱性磷酸酶染色阳性，Ost和Runx2 mRNA表达显著增高（P<0.01）；成脂诱导分化后，油红O染色可见ADSC脂滴明显增多（P<0.01），PPARγ和CEBPα mRNA表达显著增高（P<0.01）。与正常对照组相比，幼龄T1DM模型小鼠ADSC脂滴数增多（P<0.01）且增大，PPARγ和CEBPα mRNA表达亦显著增高（P<0.01）。结论 幼龄T1DM模型小鼠ADSC体外成脂分化能力增强。
