论著
张雪洁， 尧 青， 胡 玲， 柯志强， 张 波， 孟祥雯， 杨晓松
目的 探讨磷酸肌酸钠（CP）对多柔比星（DOX）所致大鼠心肌损伤的保护机制。方法 ① 体内实验：雄性SD大鼠，随机分为正常对照组、DOX组和CP+DOX联合组，均隔天给药1次，持续26 d。 DOX组前3次ip给予生理盐水5 mL·kg-1；之后ip给予DOX 2 mg·kg-1，共7次。CP+DOX组，前3次ip给予CP 200 mg·kg-1；之后隔天ip给予CP 200 mg·kg-1，30 min 后再ip给予DOX 2 mg·kg-1，共7次；之后继续隔天ip给予CP 200 mg·kg-1 ，共3 次。停药1周后进行指标检测。② 体外实验 DOX 1 μmol·L-1单独或与N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC） 0.5 mmol·L-1或与CP 1 mmol·L-1共同处理H9C2心肌细胞24 h。HE染色观察大鼠心肌组织病理变化； Masson染色检测大鼠心肌组织胶原纤维沉积；TUNEL染色检测大鼠心肌组织细胞凋亡；荧光定量PCR分析大鼠心肌组织和心肌细胞H9C2中miR-25-3p mRNA表达；CCK8法检测心肌细胞H9C2存活率；Western印迹法检测大鼠心肌组织和H9C2心肌细胞中超氧化物歧化酶2（SOD2）、肌浆网Ca2+泵-2a（SERCA2a）和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达。结果 ① 体内实验：与正常对照组相比，DOX组心肌组织中肌纤维排列紊乱，胶原纤维累积增加，细胞凋亡增加明显，miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达水平上升（P<0.05），而SOD2和SERCA2a蛋白表达水平下降（P<0.05）；与DOX组比较，CP+DOX联合组心肌组织肌纤维排列较为整齐，胶原纤维累积减轻，凋亡细胞明显减少（P<0.05），miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达水平降低，而SOD2和SERCA2a蛋白表达水平明显增加（P<0.05）。② 体外实验：DOX诱导心肌细胞H9C2内miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达呈时间依赖性上调（r=0.9681，r=0.66，P<0.05），而SERCA2a蛋白表达水平在DOX处理3 h后达到峰值，随后逐渐下降至低于细胞对照组。与细胞对照组比较，DOX组存活率显著降低（P<0.05）；与DOX组比较，CP+DOX组细胞存活率显著升高（P<0.05）；与DOX组相比，CP+DOX组H9C2细胞miR-25-3p mRNA和活化的胱天蛋白酶3蛋白表达水平下调（P<0.05），SOD2和SERCA2a蛋白表达明显增强（P<0.05）。结论 CP减轻氧化应激，抑制miR-25-3p mRNA表达，促进SERCA2a mRNA和蛋白表达，缓解DOX心肌毒性。
