中国药理学与毒理学杂志

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论著

人G类有机磷毒剂水解酶的性质

陈惠琼;张翰;杜先林;孙曼霁

2000, 14(2): 113-115.

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观察了部分纯化的人肝G类毒剂水解酶(G酶)的一些生化性质. 二硫苏糖醇(5 mmol·L^-1)使G酶活性在37℃，30 min内抑制35%；对氯汞苯甲酸(1-1000 μmol·L^-1)不影响G酶活性. 说明二硫键对酶分子的三维结构至关重要，而没有游离巯基参与酶的催化反应. 人肝G酶专一性地水解带P-F键的有机磷化合物梭曼，但不催化带P-O，P-C或P-S键的有机磷化合物的反应.

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论著

长链蝎神经毒素在小鼠体内的组织分布

李亚军;贾凌云;吉永华

2000, 14(2): 116-120.

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用Iodogen方法对马氏钳蝎的两种神经毒素BmKⅠ和BmK IT2进行了¹²⁵I放射性标记. 分别将标记产物通过腹腔或静脉注射到小鼠体内. 结果发现肾脏的放射性含量最高, 血液，肝脏，脾，肺，膈肌，心脏和大腿肌肉等组织器官中或多或少的含有放射性, 而在脑中几乎检测不到放射性。结果提示长链蝎神经毒素主要通过肾脏排泄, 且难以穿过血脑屏障.

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论著

胞内钙离子浓度与咖啡因保护小脑颗粒神经元作用的关系

王文雅;黎明涛;邱鹏新;苏兴文;林穗珍;颜光美

2000, 14(2): 101-107.

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用凝胶电泳和fura-2荧光技术测定［Ca²⁺］_i方法研究咖啡因对低钾诱导的大鼠小脑颗粒神经元凋亡的保护作用与［Ca²⁺］_i升高之间的关系. 将体外培养的小脑颗粒神经元从高钾（25 mmol·L^-1 KCl）培养基中转移到低钾（5 mmol·L^-1 KCl）培养基中，神经元发生凋亡. 但低钾引起的神经元死亡可被咖啡因（5-20 mmol·L^-1）浓度依赖性地保护，且咖啡因的这种作用不受蓝尼定(ryanodine)敏感钙释放阻断剂蓝尼定和丹曲林(dantrolene)的影响；也不被Ｌ-型钙通道阻断剂硝苯地平, 尼莫地平, 维拉帕米和NMDA受体阻断剂地佐环平抑制. 结果说明［Ca²⁺］_i的升高并不是咖啡因对小脑颗粒神经元的保护作用所必需的.

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论著

海星甾醇保护樟柳碱处理的小鼠免致学习记忆障碍

许东晖;黄世亮;许实波

2000, 14(2): 121-124.

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海星甾醇〔己二酸（5-雄甾烯-17-酮-3β-羟基）二酯〕6.4, 19.2, 57.6 mg·kg^-1·d^-1 ig, 每日1次，共30 d后，采用“Y”型迷宫实验，跳台实验，避暗法测定其对樟柳碱致小鼠学习记忆获得和再现障碍的影响. 结果表明，海星甾醇明显缩短Y型迷宫实验小鼠到达安全区的时间，减少跳台实验中的错误次数，延长潜伏期, 延长避暗法实验小鼠进入暗箱的潜伏期，减少错误次数, 24 h后重复测试得到类似结果, 与樟柳碱对照组有显著差别，达到或优于正常对照组水平. 结果说明海星甾醇能保护樟柳碱处理的小鼠免致学习记忆获得和再现障碍.

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论著

槲皮素-3-芹菜糖基芦丁糖甙对小鼠的抗抑郁作用

李云峰;杨明;袁莉;赵毅民;栾新慧;罗质璞

2000, 14(2): 125-127.

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给小鼠ip槲皮素-3-芹菜糖基芦丁糖甙(CTN-986) 0.31，1.25，5 mg·kg^-1 30 min后，小鼠强迫游泳不动时间显著缩短；CTN-986 4-40 μmol·L^-1与皮质酮0.2 mmol·L^-1共孵PC12细胞48 h，可防止皮质酮所致的PC12神经细胞损伤. 结果提示CTN-986在小鼠强迫游泳模型上有抗抑郁作用，其机理可能与神经细胞的保护作用有关.

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细胞凋亡研究中的一些热点问题

张学敏;

2000, 14(2): 81-85.

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本文评述了当前细胞凋亡研究中存在的普遍问题和主要热点领域，并重点论述了半胱天冬酶-3(caspase-3)和Bcl-2之间的相互关系，对细胞凋亡调控研究的现状以及以凋亡机制中关键性蛋白为靶标的新药设计等热点领域最新进展.

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论著

丝裂原活化蛋白激酶参与血小板源生长因子刺激的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖

李江;黄韶玲;郭兆贵

2000, 14(2): 86-90.

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选择大鼠主动脉平滑肌细胞作为细胞模型，观察丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖中的作用。用［^３Ｈ］ＴdＲ参入率作为衡量VSMC增殖的指标，以Western印迹方法，用磷酸化一抗测MAPK磷酸化的程度作为衡量MAPK活性的指标，实验结果发现，PDGF(0.02-20 μg·L^-1) 诱导VSMC增殖呈剂量依赖性。PDGF(2 μg·L^-1)能持续性激活MAPK。用PD98059(10-100 mol·L^-1)预处理15 min后, MAPK活性较对照组均有明显差别(P<0.05). MAPK 反义寡核苷酸能明显抑制PDGF诱导的MAPK的激活，并明显抑制VSMC ［^３Ｈ］ＴdＲ参入。上述结果表明，MAPK参与PDGF促细胞增殖的信号途经，它的持续性激活与细胞增殖有关，针对p42/p44 MAPK设计的反义寡核苷酸类能有效抑制PDGF诱导的血管平滑肌细胞增殖。

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论著

缓激肽与硝酸甘油对心脏过敏反应的保护作用

肖珺;李元建;邓汉武;刘桂珍

2000, 14(2): 91-95.

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研究了外源性缓激肽与硝酸甘油对豚鼠心脏过敏反应的保护作用. 豚鼠致敏后，离体心脏抗原攻击能显著降低冠脉流量,左室内压和左室内压最大变化速率以及延缓房室传导. 缓激肽（50和500 nmol·L^-1）与硝酸甘油（300 nmol·L^-1）能显著增加冠脉流出液中降钙素基因相关肽（CGRP）的含量，同时减轻心脏过敏所致的心功能下降和房室传导阻滞。结果提示：外源性缓激肽与硝酸甘油对心脏过敏反应有保护作用，其作用可能与促进CGRP释放有关.

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论著

构建能与pZ189系列穿梭质粒配套适用的真核细胞表达载体

胡文蔚;余应年;陈星若;谢海洋

2000, 14(2): 144-148.

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为有效分离实验系统中同时存在于哺乳类细胞中的两种质粒, 利用插入失活对真核细胞表达质粒的抗性进行改建. 以具有编码氨苄抗性基因的pREP9质粒和同时有编码氨苄和卡那抗性基因的pMAMneo质粒为起始模板得到无氨苄抗性而具有卡那抗性的真核细胞表达质粒: pREP9-amp^-和pMAMneo-amp^-. 前者可用于外源基因在细胞内的持续表达而后者对外源基因表达受地塞米松的诱导. 当细胞中同时转染有其他抗性的质粒时，可以通过抗生素抗性的不同而使两种质粒得到有效地分离和筛选, 并能与pZ189穿梭质粒配套应用于突变研究.

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简报

甲磺酸酚妥拉明对大鼠和家兔性行为的影响

张中启;柳用绍;袁莉;宫泽辉

2000, 14(2): 154-156.

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应用阴茎勃起和交配行为及性激素测定实验观察了甲磺酸酚妥拉明(PM)对大鼠和家兔性行为的影响. 结果显示，大鼠po PM 10-20 mg·kg^-1或兔po PM 4-25 mg·kg^-1均能显著增加其阴茎勃起次数，延长阴茎勃起时间和提高动物阴茎勃起的阳性率. 起效时间均为po后1 h左右. 持续时间大鼠约30 min，兔约2 h左右. 另外，po PM对大鼠和兔的交配行为和血清性激素水平均没有明显的影响. 以上结果表明，PM是一种不促进性欲和非中枢作用的阴茎勃起促进剂.

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简报

川芎嗪对慢性支气管炎肺泡巨噬细胞上CD11c和CD14量的影响

彭则;张珍祥;徐永健

2000, 14(2): 157-160.

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对19例慢性支气管炎（慢支）缓解期患者和15例正常对照者经局部支气管肺泡灌洗获取的肺泡巨噬细胞(AM)，加川芎嗪(ligustrazine)，脂多糖(LPS)体外培养24 h后，以流式细胞仪分析其CD11c和CD14表达的百分率；测定其胞浆游离钙水平. 慢支组AM膜上CD11c和CD14的表达均显著高于正常对照组；100 mg·L^-1 LPS可使慢支组AM膜上CD11c的表达进一步增加；400 mg·L^-1川芎嗪可明显减少LPS诱导慢支组AM膜上CD11c的过度表达. 慢支组AM胞浆中基础钙水平较正常对照组明显增高，但其静息钙水平与正常对照组无显著差异性；400　mg·L^-1川芎嗪明显抑制10 mg·L^-1 LPS诱导慢支AM胞浆游离钙水平的升高. 结果提示川芎嗪通过抑制慢支患者AM胞浆游离钙水平升高下调其CD11c的表达, 可能对慢支缓解期气道内非特异性炎症有抑制作用.

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论著

3,6-（二甲氨基）-二苯并碘杂六环葡萄糖酸盐对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

邓秀玲;钱之玉;刘乃丰;侯自杰;马小亚;王美纳

2000, 14(2): 131-135.

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在大鼠可逆性大脑中动脉梗死模型上观察了3,6-（二甲氨基）-二苯并碘杂六环葡萄糖酸盐（I-93）对局灶性脑缺血再灌注损伤的影响. 缺血前10 min ip I-93 0.125, 0.25, 0.5 mg·kg^-1呈剂量依赖性抑制缺血3 h再灌注3 h所引起的血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶活性的升高，缩小脑梗死范围，降低大鼠死亡率，改善脑超微结构损害. 结果表明I-93对缺血再灌注引起的脑损伤具有保护作用.

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论著

合用C-Raf和PKC-α mRNA为靶点的反义寡核苷酸增强对肺腺癌A549细胞体外生长的抑制作用

袁守军;汤仲明;宋海峰;朱宝珍

2000, 14(2): 136-139.

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观察了靶向C-raf mRNA（ISIS5132）和PKC-α mRNA（ISIS3521）的反义硫代寡核苷酸合用对肺腺癌A549细胞体外增殖的抑制作用(MTT法). 单用药组药物浓度为500，200和80 nmol·L^-1；合用组A两药浓度分别为250，100及40 nmol·L^-1，即两药药量减半,药物摩尔浓度之和与单用药相同. 合用组B两药浓度分别为500，200及80 nmol·L^-1，但作用时间减半（各3 h），两药作用时间之和与单用药相同. 结果表明，在合用组A，两药浓度水平为100 nmol·L^-1时，对A549细胞生长的抑制作用大于ISIS3521单用药组的200 nmol·L^-1水平(P<0.01)；在合用组B，两药浓度水平为200和80 nmol·L^-1时，对A549细胞生长的抑制作用分别大于ISIS3521单用药组的200 nmol·L^-1和ISIS5132单用药组的80 nmol·L^-1水平（P<0.01）；其余合用组各个药物浓度水平的效应，与相应的单用药组的效应相近. 提示靶向不同癌基因的反义药物合用，可能增强对肿瘤细胞的抑制作用.

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论著

小檗碱对豚鼠心室肌细胞胞浆内游离钙离子浓度的影响

董德利;孙建平;罗大力;陈庆文;王枫;何树庄;杨宝峰

2000, 14(2): 128-130.

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研究小檗碱对豚鼠心肌细胞胞浆［Ca²⁺］_i的影响. 用酶解法分离单个豚鼠心肌细胞，Fluo-3/AM标记胞浆内游离钙离子，激光扫描共聚焦显微镜实时测定胞浆［Ca²⁺］_i变化. 结果，小檗碱1-100 μmol·L^-1对正常台氏液中静息状态细胞胞浆［Ca²⁺］_i无明显影响；小檗碱1 μmol·L^-1对KCl 30 mmol·L^-1引起的细胞外钙内流有抑制作用(P<0.01)，而小檗碱100 μmol·L^-1对细胞内钙库释放有强烈激动作用(P<0.01). 结果提示在豚鼠心肌细胞上低浓度小檗碱即能抑制电压依赖性钙通道，而高浓度时又能激动细胞内钙库释放.

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论著

乙醇抑制原代大鼠星形细胞神经营养因子的基因表达

陈雯;杨志强;Cynthia JM KANE

2000, 14(2): 140-143.

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为了阐明乙醇中毒对神经系统损害的机理，用0.5-5.0 g·L^-1浓度的乙醇处理原代培养的CD新生大鼠大脑皮层星形细胞，用反转录PCR和Northern印迹杂交方法同时测定神经营养因子(NGF)的基因表达水平. 结果显示0.5 g·L^-1乙醇在染毒24 h后，NGF mRNA水平开始降低，5.0 g·L^-1在染毒48或72 h后，NGF mRNA水平与对照组比较降低了50%-58%. 结果表明，乙醇中毒在体外可降低新生大鼠星形细胞NGF mRNA的生成，这种作用可干扰神经元与胶质细胞间的正常交互作用并可能与胚胎发育期乙醇接触导致的神经病理改变有关.

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论著

一个参与N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍诱发的遗传不稳定的cDNA片段的分离筛选

胡文蔚;宋韬;余应年;陈星若;谢海洋

2000, 14(2): 149-153.

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为研究甲基硝基亚硝基胍（MNNG）诱发猴肾vero细胞遗传不稳定的机理，采用mRNA差异显示分离到的MNNG处理后表达发生改变的表达序列标识（EST）相关基因进行功能筛选. 利用反义核酸阻断技术阻断其相应基因的表达，以筛选分离参与非定标性突变形成的cDNA片段. 现筛选到10号片段，其相关基因的表达被阻断后，MNNG诱发的vero细胞非定标突变率下降至自发突变水平，提示10号片段相关的基因是非定标突变发生的正相关基因.

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论著

淀粉样β蛋白_1-40对爪蟾卵母细胞表达的淋巴细胞神经递质受体功能的影响

黄福南;李文彬;张炳烈;韩志涛;房征宇;崔旭;张洁;蔡竖平

2000, 14(2): 108-112.

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观察淀粉样β蛋白_1-40(Aβ_1-40)对爪蟾卵母细胞表达的淋巴细胞神经递质受体(NR)功能的影响，探讨淋巴细胞NR功能检测在阿尔茨海默痴呆(AD)病理生理学上的意义. 将提取的人外周血淋巴细胞mRNA(50 ng)显微注射到成熟的非洲爪蟾卵母细胞，在(19.0±1.0)℃条件下孵育24 h后采用双电极电压钳位记录-60 mV维持电位时的受体激活电流. Aβ_1-40于记录前12 h加入孵育液. 结果发现注射人外周血淋巴细胞mRNA的爪蟾卵母细胞能表达出乙酰胆碱, 谷氨酸, 多巴胺, 5-羟色胺和γ-氨基丁酸受体. 这些表达的受体激活电流的共性是由氯离子载流的内向电流，其平衡电位接近于-22 mV. Aβ_1-40 60 nmol·L^-1对卵母细胞表达的NR功能有抑制效应，其NR峰电流降低分别为乙酰胆碱23%, 谷氨酸27%, 多巴胺25%，维生素E有拮抗Aβ_1-40效应的作用。外周血淋巴细胞NR功能检测作为AD外周评价指标值得更深入的研究.

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论著

家兔主动脉血管平滑肌细胞内钙动员及小檗胺作用的共聚焦研究

赵艳玲;马和平;李柏岩

2000, 14(2): 96-100.

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观察小檗胺 (Ber) 对高钾除极，Bay K8644，5-羟色胺 (5-HT) 及咖啡因升高细胞内钙水平 (［Ca²⁺］_i) 的影响。以Fluo-3/AM负载家兔培养的主动脉平滑肌细胞 (VSMC)，共聚焦显微术测定［Ca²⁺］_i，结果以荧光强度(FI)表示. 结果：(1) 在细胞外钙为1.3 mmol·L^-1时, VSMC胞浆静息FI明显高于核区, 且不受Ber的影响. (2) Ber 10-100 μmol·L^-1预处理可抑制KCl 60 mmol·L^-1或Bay K8644 100 μmol·L^-1升高的［Ca²⁺］_i，抑制5-HT 1 μmol·L^-1升高［Ca²⁺］_i的持续相，但不影响［Ca²⁺］_i的一过性升高。维拉帕米10 μmol·L^-1具有相似作用. (3) 在无钙Hanks液中，Ber预处理对咖啡因100 mmol·L^-1升高的［Ca²⁺］_i无明显抑制作用。结果表明，Ber可阻断外钙内流，但不抑制内钙释放，这可能与Ber阻断电压依赖性钙通道和受体依赖性钙通道的作用有关.

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